新城疫油苗和冻干苗疫苗的生产工艺流程

新城疫冻干疫苗生产工艺流程1 生产用毒种制备 1.1 毒种繁殖 将毒种用灭菌生理盐水作适当稀释(如10-4或10-5),尿囊腔内接种10日龄SPF鸡胚,每胚0.1ml。选接种后72~120小时

新城疫冻干疫苗生产工艺流程 1 生产用毒种制备 -4-5 1.1(1010),10 毒种繁殖将毒种用灭菌生理盐水作适当稀释如或尿囊腔内接种日龄 SPF,0.1ml72~120,( 鸡胚每胚。选接种后小时死亡、且病痕明显的鸡胚分别收获鸡胚液尿囊 ),1%≥1:640(1:512) 液及羊水装于灭菌容器内。将检验无菌、且对鸡红细胞凝集价微量法的 ,,, 鸡胚液混合定量分装于安瓿中冷冻保存。注明收获日期毒种代数等。 1.2 毒种鉴定 -7-8-9 1.2.1101010103 病毒含量按含毒鸡胚液量用灭菌生理盐水作为倍系列稀释，取、、 10SPF50.1ml36~37℃48 个稀释度各尿囊腔内接种日鸡胚个，每胚，置继续孵育，小时以 48~120 前死亡的鸡胚弃去不计，在小时死亡的鸡胚随时取出，收获鸡胚液，同一稀释度 120, 的胚液等量混合，按稀释度分别测定红细胞凝集价，至小时，取出所有活胚逐个收获 ≥1:160(1:128)EID 鸡胚液，分别测定红细胞凝集价，凝集价微量法者判为感染，计算，每 50 8 0.1ml≥10EID 病毒含量应。 50 《无菌检验或纯粹检验标准 1.2.2 纯净应无细菌、霉菌、支原体和外源病毒污染，分别按 操作规程》、《支原体检验标准操作规程》、《外源病毒检验标准操作规程》进行。 1.3-15℃,1 毒种保存在以下保存应不超过年。 1.43 毒种继代应不超过代。 29~11SPF 制苗材料选择选择发育良好的日龄鸡胚作为制苗材料。 3 制苗用毒液的制备 -4-5 3.1(1010), 接种取生产用毒种用灭菌生理盐水作适当稀释如或每胚尿囊腔内接种 0.1ml36~37℃ ，接种后密封针孔，置继续孵育，不必翻蛋。 3.2,6060, 孵育和观察鸡胚接种后每日照蛋一次，将在小时前死亡的鸡胚弃去。小时后 4~8,,96120,,, 每小时照蛋一次死亡的鸡胚随时取出直至或小时不论死亡与否全部取出气 ,2~8℃ 室向上直立置于冷却。 3.34~24,, 收获将冷却小时的鸡胚取出用碘酊消毒气室部位然后以无菌手术剥除气室部 , 卵壳，剪开尿囊膜，吸鸡胚液每若干个鸡胚的胚液混合为一组。收获后的胚液置于灭菌瓶 中，作好标识，留样后，结冻保存。 ,, 在收获胚液的同时应逐个检查鸡胚如胎儿腐败、胚液混浊及有任何污染可疑者弃去 不用。 4 半成品检验