一种新的DNA测序法——双链DNA循环测序技术

一种新的DNA测序法——双链DNA循环测序技术引言：DNA测序技术的快速发展和广泛应用已经成为分子生物学和生物信息学领域的基础。传统的测序方法包括Sanger测序、Maxam-Gilbert测序和py

DNA——DNA 一种新的测序法双链循环测序技术 引言： DNA测序技术的快速发展和广泛应用已经成为分子生物学和生物信 息学领域的基础。传统的测序方法包括Sanger测序、Maxam-Gilbert 测序和pyrosequencing等。然而，这些方法的效率、分辨率和成本等 方面都存在一定的局限性。最近，一种新的DNA测序技术——双链 DNA循环测序技术又得到了发展和应用，它的出现将会给DNA测序领 域带来新的突破。 一、双链DNA循环测序技术的原理 双链DNA循环测序技术采用了一种基于DNA回路的测序策略。该 技术首先将待测DNA样品进行双链环化，将两端相接形成一个圆环形结 构，这一过程利用了DNA聚合酶的3'->5'外切酶作用，并使用连接酶进 行接头连接。接下来，通过DNA聚合酶以及不同的核苷酸和 petide-nucleotide(PEP)的添加，将多个新的双链DNAs插入到环状的 DNA样品中。通过对这些新生成的DNA链进行循环测序，即将圆环缩 成线性的完整序列，然后顺着序列方向进行测序，采用四色荧光检测技 术，就可以获得完整的DNA序列信息。整个过程类似于压缩和解压缩录 像，可以重复进行数次以得到全范围的序列信息。 二、双链DNA循环测序技术的优势 1.效率高：双链DNA循环测序技术采用了简单的样品处理步骤，借 助环状DNA结构和PEP补齐技术，使得样品量大大降低，整个过程中 长度不仅没有降低，反而有所增加，大大提高了DNA测序效率。 2.准确性高：双链DNA循环测序技术在测序过程中利用了PEP的 补齐技术，通过在双链DNA环状结构上不停地添加PEP和其他核苷 酸，可以避免以往在Sanger测序中出现的问题，例如您无法获得更长的 DNA片段，和无法恢复引起之前信号噪音的断点。实验证明，双链