一种经济高效的酵母菌落PCR模板DNA制备方法的建立

一种经济高效的酵母菌落PCR模板DNA制备方法的建立摘要本研究旨在建立一种经济高效的酵母菌落PCR模板DNA制备方法。通过比较不同提取方法得到的DNA质量和PCR扩增效率，我们发现用简易的热溶解法能够

PCRDNA 一种经济高效的酵母菌落模板制备方法 的建立 摘要 PCRDNA 本研究旨在建立一种经济高效的酵母菌落模板制备方法。 DNAPCR 通过比较不同提取方法得到的质量和扩增效率，我们发现用简 DNAPCR 易的热溶解法能够大幅提高产量和扩增效率，而且该方法不需 要使用昂贵的试剂和设备，适合于实验室常规应用。 引言 PCR 反应是分子生物学实验中必不可少的技术之一，如在酵母学研 PCRDNAPCR 究中，常常需要通过扩增靶基因的序列。反应需要利用模 DNADNA 板进行扩增。通常的做法是从菌株中提取，或者从菌液中提取 PCRDNA 菌落模板。然而，这些传统的提取方法需要使用大量的昂贵试 剂和设备，而且需要较长的时间，对实验室的经济和时间成本造成较大 PCRDNA 的影响。因此，建立一种经济高效的酵母菌落模板提取方法是 十分必要的。 方法 1. 菌落的分离和培养 从含有酵母菌株的微生物平板中通过精密的拔菌技术，在无菌条件 YPD1% Yeast 下依次拔取单独的酵母菌落。将每个酵母菌落划入含（ Extract, 2% Peptone2% D-Glucose 和）的琼脂糖平板上，培养在常规培 30℃ 养箱中（实验室环境可）温度为的条件下，等到酵母菌落形成。 2. 菌落标记 YPDA1% Yeast Extract, 2% Peptone, 2% D-Glucose1% 在（和 agar0.1mg/mL stock in DMSO ）平板中加入荧光素华盖机板（， 50μl/plateYPDA ）并均匀分布，将培养好的酵母菌落挑出并划入标记的