改良碳青霉烯灭活试验

改良碳青霉烯灭活试验（Modified Carbapenem Inactivation Method, mClM）检测肠杆菌科细菌中的碳青霉烯酶何时检测？基于流行病学或感控目的。备注：即使mClM结果

mClM 改良碳青霉烯灭活试验（检测肠杆菌科细菌中的碳青霉烯酶 Modified Carbapenem Inactivation Method, ） 一. 何时检测？ mClMmClM 基于流行病学或感控目的。备注：即使结果呈阳性，亦无需修改碳青霉烯类药敏试验结果。目前不推荐试验用于常 规检测。 二. 方法： 美罗培南灭活试验 三. 试剂和材料 1. TSB2 ml （） 2. 10ug 美罗培南纸片（） 3. 1-ul10-ul 和接种环 4. MHTSBMHA100mm150mm 营养肉汤（如肉汤、肉汤）或平板（或） 5. -ATCC25922 美罗培南敏感质控株大肠埃希菌（） 四. 步骤 1. 1ul2ml TSB 取接种环的过夜培养纯菌落于肉汤中 2. 10-15 震荡混匀秒 3. 10ug 每管放入一张含美罗培南的无菌纸片，确认纸片浸没于菌悬液中 4. 35°±2°4±15 大气环境孵育小时分钟 CC 5. 0.5ATCC 25922 孵育结束时，立即用营养肉汤或生理盐水制备麦氏浊度的大肠埃希菌悬液（直接菌悬法） 6. 153-10 菌悬液制备和平板涂布必须分钟内完成，干燥分钟 7. 10ulTSB 用接种环将美罗培南纸片从肉汤中取出，将纸片贴于试管内壁，轻轻按压以挤去纸片上多余水分，然后将纸片取出贴于已涂布有大 ATCC25922MHA100mmMHA4150mmMHA81 肠埃希菌的平板上。的平板最多贴张纸片，的平板最多贴张纸片（图）。 8. 35°±2°18-24 倒置平板，大气环境孵育小时 CC 9. 量取抑菌圈直径 图接种环取出美罗培南纸片将纸片贴于试管内壁并挤去多余水分同一接种环取出纸片并贴于平板上 1. 10ula）;b）;c ）MHAd ） （（（（ 五. 2a2b 结果解释：见图和 1. 6-15mm16-18mm 碳青霉烯酶阳性：美罗培南抑菌圈直径为或直径为但抑菌圈内有散在菌落。若待测株产生碳青霉烯酶，纸片中的美罗培南 ATCC 25922 被该酶降解，结果为无抑菌圈或抑制大肠埃希菌的活性降低。 2. 碳青霉烯酶阴性： 219mmATCC 25922 抑菌圈直径。若待测菌株不产碳青霉烯酶，纸片中的美罗培南不被水解，仍能抑制大肠埃希菌的生 长。 3. 16-18mm 中性：抑菌圈直径为，无法判断是否存在碳青霉烯酶（见备注） 图•阴性对照和阳性对照 2aBAA1706 (A )BAA1705 (B ) 图碳青霉烯酶产生株。备注：结果阳性 2b.mCIM