2019年高考生物 考点一遍过 考点80 PCR技术（含解析）

考点80 PCR技术 1．PCR原理（1）细胞内DNA复制条件条件组分作用模板DNA的两条单链提供复制的模板原料四种脱氧核苷酸合成DNA子链的原料酶解旋酶DNA聚合酶打开DNA双螺旋催化合成DNA子链

考点80 PCR技术 1．PCR原理 （1）细胞内DNA复制条件 条件 组分 作用 模板 DNA的两条单链 提供复制的模板 原料 四种脱氧核苷酸 合成DNA子链的原料 解旋酶 打开DNA双螺旋 酶 DNA聚合酶 催化合成DNA子链 能量 ATP 为解螺旋和合成子链供能 引物 RNA 为DNA聚合酶提供合成的3’端起点 （2）细胞内DNA复制过程 ①DNA的两条链是反向平行的，通常将DNA的羟基末端称为3’端，而磷酸基团的 末端称为5’端。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3’端延伸DNA链， 因此，DNA复制需要引物。DNA的合成方向总是从子链的5’端向3’端延伸。 ②在DNA的复制过程中，复制的前提是双链解开。在体外可通过控制温度来实现。 在80~100 ℃的温度范围内，DNA的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称 为变性。PCR利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。 由于PCR过程的温度高，导致DNA聚合酶失活，后来耐高温的DNA聚合酶的发现 和应用，大大增加了PCR的效率。 ③PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行，需提供：DNA模板，分别与两条模板链 相结合的两种引物，四种脱氧核苷酸，耐热的DNA聚合酶，同时通过控制温度使 DNA复制在体外反复进行。 2．PCR的反应过程 PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为变性、复性和延伸三步。从第二轮循 环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会 与引物Ⅱ结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间