外植体灭菌[修改版]

第一篇：外植体灭菌外植体灭菌 对材料的表面浸润灭菌。要在超净台或接种箱内完成，准备好消毒的烧杯、玻璃棒、酒精、消毒液、无菌水、手表等。用酒精浸10-30s。由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用，加之

第一篇：外植体灭菌 外植体灭菌 对材料的表面浸润灭菌。要在超净台或接种箱内完成，准备好消毒的烧杯、玻璃棒、酒精、消毒液、 10-30s 无菌水、手表等。用酒精浸。由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用，加之酒精穿透力强，也 很易杀伤植物细胞，所以浸润时间不能过长。有一些特殊的材料，如果实、花蕾、包有苞片、苞叶等的孕 穗，多层鳞片的休眠芽等等，以及主要取用内部的材料，则可只用酒精处理稍长的时间。 5-8min3-10 升汞是由重金属离子汞来达到灭菌的，一般处理，用无菌水冲次。 吐温是表面活性剂，主要作用使药剂更容易展布，更容易浸入到灭菌的材料表面。但吐温加入后对材 料的伤害也在增加，应注意吐温的用量和灭菌时间。处理完的材料在无菌条件下，取用内部材料。 第二篇：外植体消毒方法 外植体消毒 1 、材料：油菜、番茄、芝麻等种子或其他培养材料。 2MS 、仪器：超净工作台，含培养基的培养瓶，镊子，培养皿，酒精灯，接种器械（解剖刀、剪子、 镊子等）。 370%95%0.1%1 、试剂：酒精，酒精，升汞或漂白粉、无菌水等。方法步骤、用水和肥皂 2 洗净双手，穿上灭过菌的专用实验服、帽子与鞋子，进入接种室。、打开超净工作台和无菌操作室的紫 20 外灯，照射分钟。 370% 、上工作台后，用酒精棉球擦拭双手，然后用酒精喷雾降尘，并擦拭工作台面。 495% 、先用酒精棉球擦拭接种工具，再将镊子和剪子蘸酒精在酒精灯火焰上灼烧，放置冷却。 51 、修整接种材料，除去不用的部分，然后进行外植体消毒：（）水洗，滤纸吸干。 270%30-60 （）酒精中浸泡约秒（注意：酒精穿透力很强，时间不宜过长，以免损伤材料组织细 30.1%1010%10-154 胞）。（）在升汞中浸泡分钟；或在漂白粉上清夜中泡分钟；（）无菌水 3-5 冲洗次。 6 、接种：将种子或其他培养材料放到培养基上。 1 （）先解开包口纸，将试管或培养瓶拿成斜角，使瓶口在酒精灯火焰上方灼烧数秒钟。 2 （）用灼烧过的冷却的镊子取外植体材料转接到试管或培养瓶中，轻轻插入或放在培养基表面。