外植体灭菌[修改版]
第一篇:外植体灭菌外植体灭菌 对材料的表面浸润灭菌。要在超净台或接种箱内完成,准备好消毒的烧杯、玻璃棒、酒精、消毒液、无菌水、手表等。用酒精浸10-30s。由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用,加之
第一篇:外植体灭菌 外植体灭菌 对材料的表面浸润灭菌。要在超净台或接种箱内完成,准备好消毒的烧杯、玻璃棒、酒精、消毒液、 10-30s 无菌水、手表等。用酒精浸。由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用,加之酒精穿透力强,也 很易杀伤植物细胞,所以浸润时间不能过长。有一些特殊的材料,如果实、花蕾、包有苞片、苞叶等的孕 穗,多层鳞片的休眠芽等等,以及主要取用内部的材料,则可只用酒精处理稍长的时间。 5-8min3-10 升汞是由重金属离子汞来达到灭菌的,一般处理,用无菌水冲次。 吐温是表面活性剂,主要作用使药剂更容易展布,更容易浸入到灭菌的材料表面。但吐温加入后对材 料的伤害也在增加,应注意吐温的用量和灭菌时间。处理完的材料在无菌条件下,取用内部材料。 第二篇:外植体消毒方法 外植体消毒 1 、材料:油菜、番茄、芝麻等种子或其他培养材料。 2MS 、仪器:超净工作台,含培养基的培养瓶,镊子,培养皿,酒精灯,接种器械(解剖刀、剪子、 镊子等)。 370%95%0.1%1 、试剂:酒精,酒精,升汞或漂白粉、无菌水等。方法步骤、用水和肥皂 2 洗净双手,穿上灭过菌的专用实验服、帽子与鞋子,进入接种室。、打开超净工作台和无菌操作室的紫 20 外灯,照射分钟。 370% 、上工作台后,用酒精棉球擦拭双手,然后用酒精喷雾降尘,并擦拭工作台面。 495% 、先用酒精棉球擦拭接种工具,再将镊子和剪子蘸酒精在酒精灯火焰上灼烧,放置冷却。 51 、修整接种材料,除去不用的部分,然后进行外植体消毒:()水洗,滤纸吸干。 270%30-60 ()酒精中浸泡约秒(注意:酒精穿透力很强,时间不宜过长,以免损伤材料组织细 30.1%1010%10-154 胞)。()在升汞中浸泡分钟;或在漂白粉上清夜中泡分钟;()无菌水 3-5 冲洗次。 6 、接种:将种子或其他培养材料放到培养基上。 1 ()先解开包口纸,将试管或培养瓶拿成斜角,使瓶口在酒精灯火焰上方灼烧数秒钟。 2 ()用灼烧过的冷却的镊子取外植体材料转接到试管或培养瓶中,轻轻插入或放在培养基表面。

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