荧光定量Taqman技术在检测乙肝病毒DNA中的

荧光定量Taqman技术在检测乙肝病毒DNA中的【摘要】 目的：探讨荧光定量Taqman技术检测乙肝病毒（HBV）感染者乙肝病毒脱氧核糖核苷酸（HBVDNA）的临床意义，以及与乙肝表面抗原（HBsA

Taqman 荧光定量技术在检测乙肝病毒 DNA 中的 TaqmanHBV 【摘要】目的：探讨荧光定量技术检测乙肝病毒（） HBVDNA 感染者乙肝病毒脱氧核糖核苷酸（）的临床意义，以及 HBsAgeHBeAg 与乙肝表面抗原（）、乙肝抗原（）的相关性。方 Taqman76HBVDNA 法：采用荧光定量技术对例乙肝感染者的 76HBVDNA42.1% 检测。结果：在例标本中，的阳性率为， HBsAg75.0%HBeAg17.1% 的阳性率为，的阳性率为。结论： HBsAgHBeAgHBVHBVDNA 、反映的复制状态存在局限性，定 HBV 量检测是反映复制和药物疗效的判断最直接可靠的指标。 Taqman 【关键词】乙肝病毒；荧光定量技术；应用 Taqman 荧光定量技术是一种新的基因定量检测技术，该技术 (PCR)PCR 实现了核酸扩增从定性到定量的飞跃，融会了的高灵敏 DNA 性，杂交的高特异性和光谱技术的高精确定量等优点，有效地 PCR 解决了其他方法很难处理的污染的问题，尤其在检测乙肝病毒 DNAHBVDNA1 （）中的应用越来越受重视［］。本文结合血清 Taqman 学指标乙肝两对半，初步探讨荧光定量技术在检测 HBVDNA 中的临床价值。 1 材料与方法 1.1 标本乙型肝炎血清标本来自本院住院和门诊患者；正常血 -40℃ 清标本来自本院输血科。用一次性试管收集血液，分离血清，置 保存或立即检测。 1.2 Taqman 荧光定量技术检测 1.2.1 Roche Diagnostics GmbH 仪器与试剂仪器采用德国公司 LightCycle PCR 的扩增仪。试剂采用上海克隆生物高技术有限公司 HBVPCR 乙型肝炎病毒（）荧光定量检测试剂盒。 1.2.2 PCRTaqman 技术原理荧光定量法采用了先进的荧光探 PCR 针技术，其试剂比常规试剂多了一个寡聚核苷酸探针，这个探 针带有一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子，完整的探针在激光 下，发光分子所产生的荧光被淬灭分子全部吸收，样品无荧光，而 PCRTaq5'3' 扩增中，酶在链延长过程中，可通过自身的核酸外切 酶活性降解与模板结合的特异性荧光探针，使荧光发光分子与淬灭 PCR 分子分开，从而在激光下产生特定波长的荧光，这种荧光随着 扩增过程呈动态增强，可以检测到一个荧光增长曲线，通过测定荧 2~4 光强度可进行起始模板的定量分析［］。 1.3 标本、对照品的处理血清标本，试剂盒阳性、阴性对照各