组成型表达猪抗菌肽PF1-PR39的重组干酪乳杆菌构建及生物学活性分析的开题报告

组成型表达猪抗菌肽PF1-PR39的重组干酪乳杆菌构建及生物学活性分析的开题报告一、选题背景当今世界人们越来越注重食品的安全和健康，而橙色肉猪抗菌肽PF1-PR39是一种有效的天然抗菌肽，在肉类中的含

PF1-PR39 组成型表达猪抗菌肽的重组干酪乳杆菌 构建及生物学活性分析的开题报告 一、选题背景 当今世界人们越来越注重食品的安全和健康，而橙色肉猪抗菌肽 PF1-PR39是一种有效的天然抗菌肽，在肉类中的含量较高，可以起到抗 菌和增强免疫力的作用。为了提高PF1-PR39在食品领域的应用，研究 人员尝试将其转化为一个可用于制造食品的融合蛋白。干酪乳杆菌是一 种常见的益生菌，具有可以主动适应于不同环境应激的生存能力和双重 障碍系统的抵御能力。因此将其用于PF1-PR39融合蛋白的构建可以提 高PF1-PR39的稳定性和生物学活性。 二、研究目的 本研究旨在构建一个组成型表达猪抗菌肽PF1-PR39的重组干酪乳 杆菌，并评估其在体外和体内的生物学活性。 三、研究方法 1.构建PF1-PR39与干酪乳杆菌表面蛋白A(SSPA)的融合基因。融 合基因将PF1-PR39与SSPA蛋白序列连接起来，并加入适当的启动子 和终止信号，构建出一个可在干酪乳杆菌上表达的融合表达载体。 2.将融合表达载体转化到干酪乳杆菌中。选择适当的电转化和生化 转化方法，将融合表达载体导入干酪乳杆菌中，并筛选出正确的阳性菌 落进行进一步研究。 3.体外评估融合蛋白的生物学活性。采用孔隙板法和活菌计数法分 别对融合干酪乳杆菌的抗菌能力和益生能力进行测试，并与未转化的干 酪乳杆菌进行比较。 4.体内测试融合蛋白的生物学活性。将转化后的干酪乳杆菌分别直 接口服给小鼠或以食物方式喂养小鼠，在其肠道内测定干酪乳杆菌对小