细菌分离培养与鉴定程序

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细菌分离培养与鉴定程序 一、 背景记录 1、 猪的临床症状 2、 不同猪的发病阶段（早、中、晚、解剖前宰杀还是解剖前已死亡） 3、 解剖病变（保存好照片） 二、 分离用培养基 1、 常用培养基：鲜血琼脂培养基、巧克力培养基 2、 非常用培养基：麦康凯培养基、沙门氏菌选择性培养基 三、 病料的选取和保存 1、 2-4 首选来自刚宰杀后的活畜禽或死后小时内的畜禽 2、 得到病料后应该立即进行细菌分离，分离细菌前最长保存时间（在4℃冰箱 3-4 内）最好不要超过小时。分离细菌前应将病料保存在4℃冰箱不得放入 -20℃冰箱。分离细菌后如需要根据细菌生长鉴定情况来决定病料用途（需再 次接种、需再次触片、需接种动物等等）可先将病料暂存4℃冰箱，但不得 超过2天。一般情况下分离细菌后应及时将需长期保存的少量病料分装到塑 料瓶中进行记录保存，多余的病料进行无害化处理。 四、 分离路线 1、 选择分离细菌的目标脏器： 根据疑似疾病和病理变化确定，一般选病变比较严重的脏器做为分离细菌的 目标脏器，并选择脏器的病健交界处做为细菌分离的最终部位。一头猪应该选择 多个脏器或部位分离细菌。并对不同部位细菌在整个疾病中的作用有一定的评价， 如：心血中的细菌多为全身感染分布的病原；关节、肠道、创口、及肺脏则可能 只是局部分布的细菌。） 2、 分离细菌 一般采用鲜血琼脂培养基划线培养、怀疑存在只能在巧克力培养基上且需要 一定二氧化碳才能生长的细菌（如：副猪嗜血杆菌、传染性胸膜肺炎放线杆菌等） 感染时、应同时采用巧克力培养基划线、放到烛缸进行培养。 划线时应该在做到无菌操作的前提下尽量取较大的一块组织或较多量的分 泌物、先在培养基表面涂布一小片区域，然后弃去病料再用接种环从涂布区域开 始进行划线。这样一方面可保证分离到病料中的细菌，另一方面也能保证长出单 个菌落为进一步鉴定提供方便，同时也为评价病料中细菌含量及不同细菌数量比 例的评价提供依据。 如果病料来自病程较长或死亡动物且细菌种类复杂、难以确定病原菌的情