蛋白非变性胶详解

蛋白非变性胶详解 Native-PAGE原理 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)是在不加入SDS 疏基乙醇等变性剂的条件下， 对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，常用

蛋白非变性胶详解 Native-PAGE 原理 (Native-PAGE)SDS 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是在不加入疏基乙 醇等变性剂的条件下，对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳， SDS 常用于同工酶的鉴定和提纯。未加的天然聚丙烯酰胺凝胶电泳可以 使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷，它们的分离是依据 其电泳迁移率的不同和凝胶的分子筛作用，因而可以得到较高的分辨率， 尤其是在电泳分离后仍能保持蛋白质和酶等生物大分子的生物活性，对于 生物大分子的鉴定有重要意义，其方法是在凝胶上进行两份相同样品的电 泳，电泳后将凝胶切成两半，一半用于活性染色，对某个特定的生物大分 子进行鉴定，另一半用于所有样品的染色，以分析样品中各种生物大分子 的种类和含量。 实验方法 sds-page 非变性聚丙烯酰胺凝胶和变性电泳在操作上基本上是相同 的，只是非变性聚丙烯酰胺凝胶的配制和电泳缓冲液中不能含有变性剂如 SDS 等。 一般蛋白进行非变性凝胶电泳要先分清是碱性还是酸性蛋白。分离碱 pHpH 性蛋白时候，要利用低凝胶系统，分离酸性蛋白时候，要利用高 凝胶系统。 pH8.8 酸性蛋白通常在非变性凝胶电泳中采用的是的缓冲系统，蛋 白会带负电荷，蛋白会相阳极移动；而碱性蛋白通常电泳是在微酸性环境