甘草—多糖测定—比色法

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FYYYWFYD ZYC ZW 04512005 甘草多糖测定比色法 F_YY_YW_FYD_ZYC_ZW _0451_2005 —— 甘草多糖测定比色法 1 范围 本方法采用比色法测定甘草中多糖的含量。 Glycyrrhiza uralensis Fisch 本方法适用于豆科植物甘草()的干燥根及根茎。 2 原理 - 采用苯酚浓硫酸反应后,用分光光度法对甘草根中的多糖进行了含量测定。 3 试剂 () 除特殊注明外均为分析纯试剂 3.1 乙醇 3.2 丙酮 3.3 石油醚 3.4 乙醚 3.5 正丁醇 3.6 氯仿 3.7 过氧化氢 3.8 苯酚试剂 3.9 葡萄糖对照品 4 仪器设备与试验条件 4.1 仪器设备 4.1.1 分光光度计 4.2 试验条件 4.2.1 490nm 测定波长: 5 试样制备 5.1 对照品溶液的制备 105500mg250mL 精密称取℃干燥至恒重的葡萄糖对照品,置于量瓶中,加水至刻度, 2.55.07.510.012.515.017.5mL 摇匀,作为对照品溶液。精密量取对照品溶液,,,,,,分 50ml 别置于量瓶中,加水至刻度,摇匀,得对照品溶液。 5.2 供试品溶液的制备 3g80%200mL 精密称取干操至恒重的甘草根粉末,分别置于圆底烧瓶中,加入乙醇,回流 21.5 200mL2 提取次,每次小时,乘热过滤,药渣挥干溶剂,加入蒸馏水,提取次,每次 2400mL 500ml 5mL50mL 小时,合并提取液于容量瓶中,定容。用吸管吸取,加水定容至容 量瓶中,作供试品溶液。 6 操作步骤 6.1 标准曲线的测定 2ml1mL5mL 分别精密量取上述对照品系列溶液各,加苯酚试剂,混匀,迅速加入浓硫酸, 15 2mL 摇匀。置沸水浴中加热分钟,取出置冷水浴中冷却至室温。另以蒸馏水同法操作为 490nm AA C 空白对照。用分光光度法于处测定吸收度,以吸收度为横坐标,葡萄糖浓度为 ;C=0.077957486A- 2.14926265×10 纵坐标,绘制标准曲线,经线性回归处理得回归方程。 -4 6.2 换算因子的测定 13.1mg50mL 精密称取干燥至恒重的甘草多糖,加水适量溶解,置量瓶中,加水至刻度, 0.4ml×31.6ml 摇匀,做贮备液用。精密吸取多糖贮备液,各加入蒸馏水,按标准曲线的制备

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