紫杉醇含量测定

微球载药率和包埋率的测定 紫杉醇的定量分析采用高效液相色谱法。色谱柱采用 Inersil®ODS—3 C18 柱，流动相为乙腈/水（60/40)，流速为1mL/min，进样量为100μL，紫外检测波长

(完整word版)紫杉醇含量测定 微球载药率和包埋率的测定 紫杉醇的定量分析采用高效液相色谱法。色谱柱采用Inersil®ODS—3C18柱，流 动相为乙腈/水（60/40)，流速为1mL/min，进样量为100μL，紫外检测波长为227 nm.采用紫杉醇标准品绘制标准曲线:精密称取紫杉醇标准品10mg，溶于100mL的 乙腈/水混合溶液（60/40）中，配制成100μg/mL紫杉醇储备液，精密量取5、4、 3、2、1、0。5和0。25mL储备液于5mL容量瓶中定容，分别得到浓度为100、 80、60、40、20、10和5μg/mL的标准液,采用上述液相色谱条件进行测定得标准 曲线。微球中的紫杉醇含量的测定:精确称取10mg载药微球溶于5mL乙腈中，每个 样品做3个平行样，长时间超声后，置室温下过夜降解，漩涡3min,8000rpm下离心 5min后取上清液600μL，加400μL超纯水完全混匀，使乙腈与水的体积比为 60/40，采用上述色谱条件进行HPLC测定，将测定的峰面积代入标准曲线即可求 得样品中紫杉醇浓度，进而计算得到微球的载药率(LoadingEfficency，LE）和包埋 率（EncapsalutionEfficency,EE）。 载药微球体外释放行为测定 精密称取5mg载药微球置于8mL玻璃小瓶中，加入5mL磷酸盐缓冲溶液（PBS， pH=7.4,其中含0。1%吐温80和0。1％吐温20）。释放实验每个样品做三个平行样。 将其置于37℃恒温空气浴振荡器中振摇释放药物，振摇频率为40rpm。特定时间段， 将样品取出在8000rpm下离心5min.将微球用新的磷酸盐缓冲液重新悬浮进行进 一步的药物释放，上清液中加入2mL二氯甲烷溶液对PTX进行过夜萃取，当二氯 甲烷溶液挥发干燥后加入1mL乙腈/水溶液(60/40）溶解紫杉醇，用上述HPLC方 法测定释放的药物量.