氮蓝四唑(NBT)法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性

氮蓝四唑(NBT)法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性 实验三 氮蓝四唑（NBT）法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性 一、实验目的 1、了解氮蓝四唑（NBT）法测定植物体内超氧化物歧化

(NBT)(SOD) 氮蓝四唑法测定超氧化物歧化酶活性 NBTSOD 实验三氮蓝四唑（）法测定超氧化物歧化酶（）活性 一、实验目的 1NBTSOD 、了解氮蓝四唑（）法测定植物体内超氧化物歧化酶（） 活性的基本原理。 2NBTSOD 、掌握氮蓝四唑（）法测定植物体内超氧化物歧化酶（） 活性的基本操作方法。 二、实验原理 superoxidedismutase,SOD 超氧化物歧化酶（）普遍存在于动、植物 体内，是一种清除超氧阴离子自由基的酶。本实验依据超氧化物歧化酶抑 NBT 制氮蓝四唑（）在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质 存在下，核黄素可被光还原，被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而 产生超氧阴离子自由基，超氧阴离子自由基可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲 560nmSOD 腙，后者在处有最大吸收。而可清除超氧阴离子自由基，从 而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后，反应液蓝色愈深，说明酶活性 愈低，反之酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。 三、材料、仪器设备及试剂 （一）材料 水稻或小麦等植物叶片。 （二）仪器设备 高速台式离心机，分光光度计，微量进样器，荧光灯（反应试管处照