精编大鼠Munc13研究论文

大鼠Munc13研究论文【摘要】目的：研究大鼠胰腺发育不同阶段Munc131基因及蛋白表达的变化及Munc131在胰岛素释放过程中的作用.方法：应用显微分离及提取技术获得大鼠胚胎发育12.5d（E12

大鼠Munc13研究论文 【摘要】目的：研究大鼠胰腺发育不同阶段Munc131基因及蛋白表达的变化及 Munc131在胰岛素释放过程中的作用.方法：应用显微分离及提取技术获得大鼠胚 胎发育12.5d（E12.5）,E15.5,E18.5,新生大鼠,出生后21d（P21）及成年大鼠 胰腺组织；另外，从大鼠胚胎发育15d开始给予孕鼠半量饮食，造成宫内发育迟 缓动物模型，提取其新生大鼠胰腺组织.采用RTPCR,RealtimePCR和Westernblot 技术确定Munc131的表达情况，并测定不同发育时期血中胰岛素浓度.结果：胰 岛素基因从E12.5开始出现，Munc131基因从E15.5开始表达，随着胎龄的增长， 二者表达量皆增多.E15.5和E18.5时munc131蛋白表达量较少，以后明显增多. 自E18.5即检测到血中胰岛素的存在，随着胚胎的发育，血胰岛素浓度逐渐升高. 宫内发育迟缓新生大鼠比正常新生大鼠血胰岛素浓度低，同时Munc131基因及蛋 白表达量亦比正常对照组明显减少.结论：Munc131在胰岛素释放过程中的作用， 随着胚胎发育期胰岛素分泌的增多表达也增加，宫内发育迟缓新生大鼠胰岛素分 泌减少时，Munc131的表达亦减少. 【关键词】Munc131；胰岛素/分泌；胚胎胰腺发育；糖尿病；宫内发育迟缓 0引言 胰岛素在β细胞内合成后，以分泌颗粒的形式贮存在大致密囊泡中，在营养 物质（葡萄糖、氨基酸、脂肪酸等）、神经递质、激素等刺激下，进入血循环， 完成其调节体内营养物质代谢，调节生长发育，控制血糖动态平衡的生理作用 ［1-2］.业已证实，胞吐过程是涉及许多蛋白因子的复杂过程，可溶性N甲基马 来酰胺融合蛋白附着蛋白受体 (solublenethylmaleimidesensitivefusionproteinattachmentproteinrecepto rs,SNARE)复合体是胞吐过程所必须的分子构件；Munc，Synaptotagmin，Rab等 蛋白家族的不同成员是其重要的调节因子.这些因子在神经递质胞吐中研究得较 多，但他们在胰岛素分泌过程中的确切作用及其精细功能如何尚无定论［3-5］. 我们运用基因芯片技术，已建立了大鼠不同发育阶段基因表达谱，初步明确了胰 岛素释放的完善过程中相关基因的表达情况，在此基础上，我们重点从胰岛素释 放关键因子之一Munc131入手，探讨正常及异常胰腺发育情况下Munc131表达的 1