DNA的粗提取与鉴定

DNA的粗提取与鉴定一实验目的 1.初步掌握DNA粗提取和鉴定的方法。 2.观察提取出来的DNA物质二 、实验原理1.血细胞在蒸馏水中会渗透吸水过度而导致细胞膜和细胞核膜的破裂。利用此特性可得到含

DNA 的粗提取与鉴定 一实验目的 1.初步掌握DNA粗提取和鉴定的方法。 2.观察提取出来的DNA物质 二、实验原理 1.DNA 血细胞在蒸馏水中会渗透吸水过度而导致细胞膜和细胞核膜的破裂。利用此特性可得到含有的溶液。 2.DNADNA0.14 mol 在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。在物质的量浓度为 LDNA ／的氯化钠溶液中的溶解度最低，利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的析出 3.DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较 DNA 少的。 4.DNADNA 遇二苯胺（沸水浴）会变成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定的试剂。三、方法与过程 1.0.1g/mL100mL 制鸡血细胞液（活鸡鲜血经分离或沉淀获得）柠檬酸钠 180mL 500mL 活鸡鲜血烧杯中，玻棒搅拌，离心、分离或静置沉淀。 2.DNA 提取 . ⑴提取血细胞核物质： 5-10mL20mL ①取血细胞＋蒸馏水，用玻棒沿一个方向快速搅拌 DNA ②纱布过滤：滤液中含和其他核物质，如蛋白质。 ③原理：血细胞的细胞膜、核摸吸水胀破，玻璃棒快速搅拌，机械加速血细胞破裂。 .DNA ⑵溶解核内的 2mol/LNaCl40mL 滤液＋的溶液，玻棒沿一个方向轻缓搅拌。 .DNA ⑶析出含的粘稠物 在上述溶液中缓缓加入蒸馏水，并沿一个方向轻轻搅拌，出现丝状物；当丝状物不在增加时，停止加水（此时 NaCl0.14mol/L 溶液的浓度相当于）。 .DNA ⑷滤取含的粘稠物 DNA 用多层纱布过滤，含的粘稠物留在纱布上。 1