产氢光合细菌PHB合酶活性的一种检测方法

产氢光合细菌PHB合酶活性的一种检测方法产氢光合细菌PHB合酶活性的一种检测方法摘要：本文介绍了一种检测产氢光合细菌PHB合酶活性的方法。该方法基于PHB合酶的酶促反应将α-酮戊酸还原为3-羟基丁酸，

PHB 产氢光合细菌合酶活性的一种检测方法 产氢光合细菌PHB合酶活性的一种检测方法 摘要：本文介绍了一种检测产氢光合细菌PHB合酶活性的方法。该 方法基于PHB合酶的酶促反应将α-酮戊酸还原为3-羟基丁酸，并用高效 液相色谱法（HPLC）测定反应产物3-羟基丁酸的浓度。实验结果表明， 该方法操作简便、准确度高、检测灵敏度好，可用于研究产氢光合细菌 中PHB合酶的活性和其在光合作用中的作用。 关键词：产氢光合细菌；PHB合酶；酶促反应；HPLC 一、引言 产氢光合细菌是一类单细胞生物，生长环境在适宜的条件下可利用 阳光或人工灯光进行光合作用，产生氢气。这类细菌中的PHB合酶是合 成多羟基脂肪酸的重要酶，它参与了光合作用中有机物的合成和分解过 程，因此对光合细菌中PHB合酶的活性的研究非常重要。 目前，研究PHB合酶活性的方法较多，如基于酶作用原理的连续荧 光检测法、比色法、稳定同位素标记法等。但这些方法存在操作过程复 杂、检测灵敏度低等缺点。因此，本文提出了一种检测产氢光合细菌 PHB合酶活性的方法，通过PHB合酶的酶促反应将α-酮戊酸还原为3- 羟基丁酸，并用高效液相色谱法（HPLC）测定反应产物3-羟基丁酸的浓 度。 二、实验原理 PHB合酶是一种长链多聚羟酸合成酶，它可以催化羟基戊酸的聚合 形成聚羟酸。在该酶催化下，α-酮戊酸还原为3-羟基丁酸，反应式如 下： α-酮戊酸+NADH+H+→3-羟基丁酸+NAD+