一种重组TaqDNA聚合酶及其制备方法

一种重组TaqDNA聚合酶及其制备方法一种重组Taq DNA聚合酶及其制备方法本发明涉及基因工程【技术领域】，具体是一种制备水生栖热菌（Thermusaquaticus)TaqDNA聚合酶基因重组表达

一种重组TaqDNA聚合酶及其制备方法 一种重组TaqDNA聚合酶及其制备方法 本发明涉及基因工程【技术领域】，具体是一种制备水生栖 热菌（Thermusaquaticus)TaqDNA聚合酶基因重组表达酶的 方法。该基因核苷酸序列及编码蛋白质的氨基酸序列分别为 SEQIDNO：1和SEQIDNO：2。本发明通过基因克隆技术克隆 出基因序列，构建原核表达载体，利用已构建的TaqDNA聚 合酶基因的重组菌株，利用LB培养液进行悬浮，37℃培养 4.5小时后，加入终浓度为0.5mM的IPTG诱导16-20小时， 离心收集菌体后使用2-4mg/ml溶菌酶解离得到蛋白液，通 过层析柱和透析袋过滤，得到高纯度活性蛋白TaqDNA聚合 酶。与现有技术相比，本发明生产工艺稳定性好，得到的 TaqDNA聚合酶活力高，可有效地保证产品产量和纯度，用于 基因PCR扩增效果良好。 【专利说明】—种重组TaqDNA聚合酶及其制备方法 【技术领域】 [0001]本发明涉及基因工程【技术领域】，具体涉及一种制 备重组TaqDNA聚合酶的方法。【背景技术】 [0002]1985年,美国Cetus公司发明了具有划时代意义的聚 合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)，是一种 对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的方法，即双链DNA 在高温下变性解链成单链，在DNA聚合酶、dNTP、特异引物