人颗粒溶素活性片段在大肠杆菌中的融合表达及其突变体的构建的任务书

人颗粒溶素活性片段在大肠杆菌中的融合表达及其突变体的构建的任务书任务书：背景与意义：人颗粒溶素活性片段（hCAP-18）是一种由人体巨噬细胞产生的抗菌肽，具有广谱抗菌、消炎和促进伤口愈合的功能，是目前

人颗粒溶素活性片段在大肠杆菌中的融合表达及其突 变体的构建的任务书 任务书： 背景与意义： hCAP-18 人颗粒溶素活性片段（）是一种由人体巨噬细胞产生的抗菌肽， 具有广谱抗菌、消炎和促进伤口愈合的功能，是目前临床上广泛使用的 hCAP-18 一种抗菌剂。因此，对的研究具有重要的理论和应用价值。 hCAP-18 在这里，我们的目的是利用大肠杆菌作为表达宿主，进行的融 hCAP-18 合表达，探究其最优表达条件，并构建的突变体，深入研究其 生物活性。 任务： 1. PCRhCAP-18hCAP18 利用技术从人体巨噬细胞中扩增基因，构建原 核表达载体。 2. TOP10 转化大肠杆菌，筛选阳性克隆，进行表达优化。 3. SDS-PAGEWestern blot 利用、等方法鉴定融合蛋白表达情况，选择最 优表达条件。 4. hCAP-18 构建的突变体，进行功能鉴定。 5. hCAP-18 采用细胞毒性、测菌圈等方法检测及其突变体的生物活性。 要求： 1. PCR 了解技术、大肠杆菌表达系统及基本鉴定方法。 2. 熟练掌握大肠杆菌的质粒转化、表达、纯化方法。 3. 熟悉蛋白的分子生物学、生物化学特性以及晶体学分析方法。