黑曲霉UB_4和NB_3的原生质体制备及其再生条件的研究

黑曲霉UB_4和NB_3的原生质体制备及其再生条件的研究黑曲霉 UB和 NB的原生质体制备及其再生条件的研 究4 3 郝勃() 华中农业大学微生物系 ,武汉 430070 摘要 :以两株黑曲霉营养缺陷

黑曲霉UB_4和NB_3的原生质体制备及其再生条件的研究 黑曲霉 UB和 NB的原生质体制备及其再生条件的研 究4 3 郝勃 () 华中农业大学微生物系 ,武汉 430070 摘要 :以两株黑曲霉营养缺陷型突变株 UB和 NB为材料 ,对于其原生质体制 备及其原生质 43 体再生条件作了详细的研究 ,从中找到了合适的破细胞壁方法和培养条件 ,为 尔后的黑曲霉原生质 体的利用如融合或诱变育种等方面的研究奠定了基础 。 关键词 :黑曲霉 原生质体 再生 自Bachmann 和Bo nner 在1959 年首次报GM ,即 MM 成份加 YPM 成汁液 体培养基或 (道利用酶解破壁方法从粗糙脉孢霉 Neu ros po2份 。1 )ra crasa菌丝 体释放原生质体以后, 在其它 (11113 工具酶 ,为蜗牛酶 中科院生物物理各种 真菌的原生质体制备和再生的研究陆续开 )( )所、溶菌酶 SERVA ,N .Y. ,U SA和纤维素酶2 ,极大丰富了人们对于真菌细胞外表和其展( )Yalkult Ho nsha Co .“ONO ZU KA”R -10,以 3生理功能的知识,尤其对于 70 年代中期兴起 适 当稳定剂溶解 ,过滤除菌备用 。5 的原生质体融合这一新的遗传育种手段在丝状 11114 稳定剂 ,为 PBA 缓冲溶液或 PBAD 3( )PBA 加5 mmol DT T即二硫苏 糖醇或 KB 钾真菌的应用起到了启动作用。但对于黑曲 5盐缓冲液。 霉这一类 重要的工业微生物的原生质体制备和 112 方法 再生的研究仍属少见 ,为此 ,作者首先通过常规 11211 菌丝体培养 ,液体摇瓶法按文献6 ;固 (诱变方法获得了黑曲霉 UV -11 目前国产糖