DNA的复制与修复-王镜岩《生物化学》第三版笔记完美打印

第十六章DNA的__与修复--王镜岩《生物化学》第三版笔记(__打印.___43风帆，不挂在桅杆上，是一块无用的布；桅杆，不挂上风帆，是一根平常的柱；理想，不付诸行动是虚无缥缈的雾；行动，而没有理想，

第十六章DNA的__与修复--王镜岩《生物化学》第三版笔记(__打印.___43风帆，不挂在桅 杆上，是一块无用的布；桅杆，不挂上风帆，是一根平常的柱；理想，不付诸行动是虚无缥 缈的雾；行动，而没有理想，是徒走没有尽头的路。44成功的门往往虚掩着，只要你勇敢去 推，它就会豁然洞开。 第十六章DNA的__与修复 第一节 DNA的__ 一、半保留__ （semi-conservation replication） （一）证据： 1.用氮15标记大肠杆菌DNA，然后在氮-14中培养，新形成的DNA是杂合双链，即双链中一 条是重链（约重1％），一条是轻链。第二代则有一半全是轻链，一半是杂合双链。 2.大肠杆菌DNA在用氚标记的胸苷__近两代，放射自显影，未__部分银密度低，由一条放射 链和一条非放射链组成；已__部分有一条双链是放射的，一条双链有一半是放射的。这证明 大肠杆菌DNA是环状分子，以半保留方式__。 （二）特点：子代保留一条亲代链，而不是将它分解。这说明DNA是相对稳定的。双螺旋 DNA（或RNA）是所有已知基因的__形式。 二、__的起点和单位 （一）基因组能__进行__的单位称为__子。原核生物是单__子，真核生物是多__子。每个__ 子有起点。通过测定基因出现的频率可以确定起点位置，距离起点越近的基因出现的频率越 高。起点有发动__的序列，也有决定拷贝数的序列。起点的结构是很保守的。 （二）__终止点：已发现Ecoli的与__终止有关位点，其中含有2__p的保守序列，由tus 蛋白与此位点结合参与__的终止。真核生物中似乎没有__终止点。 （三）__多数是双向、对称的，但也有例外。通过放射自显影可以判断__是双向还是单向： 先在低放射性培养基中起始__，再转移到高放射性培养基中，如是双向__，其放射自显影图 是中间银密度低；单向__则为一端低。 （四）单向__有一些特殊方式： 1.滚动环：噬菌体φX174DNA是环状单链分子，__时先形成双链，再将正链切开，将5'连接 在细胞膜上，从3'延长，滚动合成出新的正链。 2.取代环：线粒体DNA__时是高度不对称的，一条链先__，另一条链保持单链而被取代，呈 D环形状。这是因为两条链的__起点不同，另一条链的起点露出才能__。 三、有关的酶 （一）反应特点： 1.以四种dNTP为底物 2.需要模板指导 3.需要有引物3'-羟基存在 4.DNA链的生长方向是5'-3' 5.产物DNA的性质与模板相同 （二）大肠杆菌DNA聚合酶 1.DNA聚合酶I：单链球状蛋白，含锌。有聚合酶活性和外切酶活性，其中3'-5'外切酶活性 起校正作用，5＇-3＇活性起修复和切除引物作用。DNA聚合酶I主要起损伤修复作用。每秒 可聚合10个碱基。切除氨基端5＇-3＇外切酶活性后称为Klenow fragment，用于引物标记 等。 2.DNA聚合酶II：单链，以切口双链DNA为模板，作用不清楚。 3.DNA聚合酶III：起DNA__作用，功能与聚合酶I相似。全酶共10种亚基，含锌。每秒可 聚合1000个碱基。