ELISA试验基本步骤及材料和试剂

ELISA基本步骤和主要试剂、材料注意：本步骤为间接ELISA步骤一 主要步骤1 包被取所要包被的物质，提前设计好所需浓度，根据包被孔数计算所需包被物的量，用包被液稀释至所需体积，分加至各孔中。包被条

ELISA 基本步骤和主要试剂、材料 ELISA 注意：本步骤为间接步骤 一主要步骤 1 包被 取所要包被的物质，提前设计好所需浓度，根据包被孔数计算所需包被物的量， 用包被液稀释至所需体积，分加至各孔中。 ELISA4℃37℃2 包被条件：两种选择：一是将板直接置过夜；也可以先置孵育 4℃ 小时再转入过夜。 2 洗涤 PBSTPBST5-10 包被结束后弃掉包被液，用进行洗涤，方法为加满每孔，静置 min3-5ELISA ，弃掉洗液，重新加满，重复洗涤次，最后拍干板等待下一步封闭。 3 封闭 10%2ELISA 常用小牛血清，取第步的板加封闭液至每孔，体积至少为所加包 4℃37℃2-4h 被液的两倍。封闭条件也有两种选择：直接置于过夜，或者置于温育，具 ELISA 体何种条件不同物质的可能不同。 4 洗涤 ELISA2 封闭结束的板进行洗涤，方法同步骤。最后拍干等待加入一抗。 5 加入一抗 一抗即为你要检测的物质，一般加之前需要稀释，具体稀释倍数不同实验不同 需要自己摸索。一抗样品一般用包被液稀释，稀释到所需浓度后加入到相应孔中。反 37℃2h 应条件为孵育。 6 洗涤 4 具体同步骤。 7HRP- 加相应标记的商品化二抗