生物物理最终版--期末总结

荧光：荧光产生的机理是什么？P233（一） 荧光的产生(1)分子的能量状态在光学分析中涉及的分子能级：Eo=Ee+ Ev + ErEe：价电子运动能（电子能级）, electronEv：原子在平衡位置

荧光： 1． 荧光产生的机理是什么？ P233 （一）荧光的产生 (1) 分子的能量状态 在光学分析中涉及的分子能级： Eo=Ee+Ev+Er Ee,electron ：价电子运动能（电子能级） Ev,vibration ：原子在平衡位置附近的振动（震动能级） Er,rotation ：分子绕其重心的转动能（转动能级） Ee>Ev>Er 其中 (2)EnergyLevelsTransition 分子的能级与跃迁 2． 荧光技术研究的生物学样品的主要参数有哪些？量子产率与荧光强度的区别及关系是什 么？荧光偏振的意义是什么？ P234-237 荧光分光光度术中的参量： (1) 荧光光谱及主要谱参量 荧光光谱包括：镜像对称。 (excitationspectrum)(ex) 激发光谱波长：——最大激发波长； (emissionspectrum)(em,max) 发射光谱波长：——最大发射波长。 (2) (fluorescenceintensity,F,I)(quantumyield,) 荧光强度与量子产率 A(ex) ．荧光强度的定义：在一定激发波长λ作用下，发射的荧光强弱。由于发射的荧光为 F 一光谱，所以发射的荧光强度常常是指发射某一波长的荧光。测得的不是光能量的绝对 值大小或光子数，而是在一定的仪器条件下测得的一种相对强度。 B=/1 ．发射光子数吸收光子数。表示某种物质的发光本领。任何物质的不会大于，且同一 物质在不同的环境下，不同。 -cL -cL εε F=IaIa=I-II=I10F=I(1-10) ，，→→ 00 0 CF=IcL →当很低时ε→F与C成正比； 0 CF=I →当较大时→F与C无关。 0 (3) (fluorescencepolarization) 荧光偏振 Fluorescencepolarization--P=(I-I)/(I+I) 荧光偏振度 //// Fluorescenceanisotropy--A=(I-I)/(I+2I) 荧光各向异性 //// 荧光偏振度的物理意义： AI=IP=0 ：，，自然光，荧光分子运动很快，取向随机。（稀溶液） // BII0P=1 ：或为，±，偏振光，荧光分子运动很慢，取向有序。 // CII00<P<1 ：，，生物大分子的荧光属于这种情况。 // (4) (fluorescencelifetime--) 荧光寿命 1/e 荧光衰减为原来激发时最大荧光强度的所需要的时间。 -kt I=Ie=1/k ， 0 (5) (fluorescenceprobe) 荧光探针 具有环状共轭双键即π电子系统； 量子产率随环境变化，而且变化很大； 能产生稳定荧光的小分子；