肿瘤坏死因子-α(TNF-α)生物学活性测定

肿瘤坏死因子-α(TNF-α)生物学活性测定　肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是一种主要由单核-吞噬细胞产生的单核因子，不仅具有选择性地杀伤某些肿瘤细胞，而且有多种免疫调节作用。其检测方法主要包括生

肿瘤坏死因子生物学活性测定 -α(TNF-α) 肿瘤坏死因子是一种主要由单核吞噬细胞产生的单核因子，不仅具有选择性地杀伤某些肿 -α(TNF-α)- 瘤细胞，而且有多种免疫调节作用。其检测方法主要包括生物学活性测定和免疫学检测方法。其中细胞毒 生物学检测方法敏感性较高，最为常用；免疫学检测方法包括酶联免疫吸附试验 (ELI… 肿瘤坏死因子是一种主要由单核吞噬细胞产生的单核因子，不仅具有选择 -α(TNF-α)- 性地杀伤某些肿瘤细胞，而且有多种免疫调节作用。其检测方法主要包括生物学活性测定和 免疫学检测方法。其中细胞毒生物学检测方法敏感性较高，最为常用；免疫学检测方法包括 酶联免疫吸附试验和放射免疫测定法。 (ELISA) 一原理 (): 受体广泛地分布于多种肿瘤细胞和血细胞，根据与相应靶细胞结合后引 TNF-αTNF-α 起不同的生物学效应，建立了多种检测生物学活性方法。某些肿瘤细胞膜表面的 TNF-α 受体与结合后，可导致这些肿瘤细胞的死亡，可通过检测对肿瘤细胞的杀伤 TNF-αTNF-α 能力，来反映的生物学活性。若这种肿瘤细胞先用标记，则被杀伤后３ TNF-α3H-TdR 释放至细胞外，牽通过测定肿瘤细胞释放３的量来反映的杀伤活 H-TdRIH-TdRTNF-α 性。 二操作步骤 (): ％胰蛋白酶消化处于对数生长期的细胞 0.25L929 ↓ 用洗涤细胞后，调整细胞浓度至６／ RPMI16402×10ml ↓ 加入３，／ H-TdR20μciml ↓ 置℃，％培养箱中～，摇动次／ 375CO23h130min ↓ 用洗涤次，／次 RPMI16402800rpm×5min ↓ 调整细胞浓度至～５／后，加入孔 23×10ml96 培养板中，／孔 100μl ↓ 加入不同稀释度的待测样本设三个重复孔 () ↓ 加入放线菌素，使放线菌素最终浓度至／ DD1μgml 用时设放线菌素、完全培基阴性对照和标准 rTNF-α 品阳性对照 ↓℃％培养中 37,5CO24h 加入％胰蛋白酶和％酶各／孔 30.25DNA10μl