清除自由基研究方法汇总

电子自旋共振法（ESR）、高效液相色谱法、化学发光法、比色法、分光光度法自由基清除剂也称为抗氧化剂，可清除体内多余的自由基，减轻它们对机体的损伤。目前常用超氧阴离子自由基体系（O2-·）、羟基自由基体

电子自旋共振法（ESR）、高效液相色谱法、化学 发光法、比色法、分光光度法 自由基清除剂也称为抗氧化剂，可清除体内多余的自由基，减轻它们对机体 的损伤。目前常用超氧阴离子自由基体系（O2-·）、羟基自由基体系（·OH）、 二苯代苦味酰基自由基体系（DPPH·）对某抗氧化剂的体外清除自由基能力进行了 研究。 其中 ESR法和气相色谱法、HPLC 法对自由基的检测灵敏度高，但对设备要 求较高，操作复杂，无法在一般实验室普及。而其中的分光光度法、化学发光法、 荧光分析法等不需要昂贵的仪器，易于被一般实验室所采用，但测定过程中的干扰 因素较多，容易对测定的准确性和灵敏度造成影响。分光光度法最常用。 原理部分： 1.DPPH·法测试机理 DPPH·（二苯代苦味脐基自由基）的甲醇溶液呈深紫色，可见光区最大吸收 峰为492nm。当自由基清除剂加入到DPPH·溶液中时，DPPH·的单电子被配对而使 其颜色变浅，在最大吸收波长处的吸光度减少，而且颜色变浅的程度与配电子数成 化学计量关系，因此，可通过吸光度减弱的程度来评价自由基被消除的情况。 2. 羟基自由基（·OH） 1）邻二氮菲法[70] 实验原理：邻二氮菲可与 Fe2+形成络合物，此络合物在 510nm 处有最大吸 收峰，是一常用的氧化还原指示剂，其颜色变化可敏锐地反映溶液氧化还原状态的 改变。H2O2/ Fe2+体系可通过 Fenton 反应产生羟自由基，邻二氮菲－Fe2+水溶液 被羟自由基氧化为邻二氮菲－Fe3+后，其 510nm 最大吸收峰消失。如果反应体系 中同时存在羟自由基清除剂，则 Fenton 反应产生的羟自由基将被此清除剂全部或