CD133原核表达、纯化和初步鉴定

CD133原核表达、纯化和初步鉴定CD133原核表达、纯化和初步鉴定引言CD133是一种常见的肿瘤干细胞标记物，高表达与多种肿瘤的发展和预后密切相关。近年来，越来越多的研究者开始致力于研究CD133的

CD133 原核表达、纯化和初步鉴定 CD133原核表达、纯化和初步鉴定 引言 CD133是一种常见的肿瘤干细胞标记物，高表达与多种肿瘤的发展 和预后密切相关。近年来，越来越多的研究者开始致力于研究CD133的 表达、功能、调控及机制等方面，其中，CD133蛋白的原核表达和纯化 是研究其生物学功能的前提。因此，本文结合实验室的研究经验，介绍 了CD133的原核表达、纯化以及初步鉴定。 实验材料和方法 材料 1.pET28a-CD133载体(3.0kb，含有CD133全长CDNA序列); 2.BL21(DE3)E.coli菌株; 3.亚硫酸铵[(NH4)2SO4]、Tris-HCl、EDTA、NaCl、β-己内酰胺 和DTT等常用试剂； 4.超声波细胞粉碎仪（JY92-IIN型），高速离心机（Eppendorf 5417R）； 5.SDSPAGE电泳仪，蛋白质印迹仪； 6.脂多糖(LPS)检测试剂盒（Bio-Rad）； 7.HIS-SelectNickelAffinityGel（Sigma）。 方法 1.CD133重组蛋白的原核表达： a)用QIAGENMiniprepKit从E.coli菌株中提取CD133载体质 粒；