菌体理化性质鉴定试验

菌体理化性质鉴定试验 1 V-P试验 原理:菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸缩合,脱羧成乙酰甲基甲醇,后者在强碱环境下,被空气中的氧氧化为二乙酰,二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色

菌体理化性质鉴定试验 1V-P试验 原理:菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸缩合,脱 羧成乙酰甲基甲醇,后者在强碱环境下,被空气中的氧氧化为二乙酰,二乙酰与蛋白 胨中的胍基生成红色化合物,称V-P(+)反应。 培养基配制方法: 蛋白胨5g;葡萄糖5g;NaCl(K2PO4):5g;蒸馏水:1000mL;PH:7.0~7.2,分装试 管,毎管装约4~5cm,115℃灭菌20min。 试剂:40%NaOH(或KOH),a-萘酚。 试验方法: 将试验菌接种于上述培养基,于36±1°C培养4天、培养液2.5ml先加入a 萘酚(2-na-phthol)纯酒精溶液0.6ml,再加40%氢氧化钾水溶液0.2ml,摇动 2~5min,阳性菌常立即呈现红色,若无红色出现,静置于室温或36±1°C恒温箱,如 2h内仍不显现红色、可判定为阴性。 结果记录:阳性:+,阴性:-。 2甲基红(MethylRed)试验 原理:有些细菌能发酵葡萄糖,在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸,进一步分解 中,由于糖代谢的途径不同,可产生乳酸,琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物,可使 培养基PH值下降至pH4.5以下,使甲基红指示剂变红。 培养基配制方法: