β—胡萝卜素和番茄红素提取分离与测定

B—胡萝卜素和番茄红素提取分离与测定一、实验目的1、学习从天然产物中提取有机化合物的方法。2、学习用薄层层析法检验有机化合物的基本原理， 点样，展开和计算 Rf 值的方 法。二．仪器和试剂仪器三角瓶（

胡萝卜素和番茄红素提取分离与测定 B— 一、实验目的 、学习从天然产物中提取有机化合物的方法。 1 、学习用薄层层析法检验有机化合物的基本原理，点样，展开和计算值的方法。 2Rf 二．仪器和试剂 仪器三角瓶（）、分液漏斗（）、蒸馏瓶（）、普通蒸馏装置（或减压 50ml150ml50ml 蒸馏装置）、漏斗、色谱柱、硅胶薄层板、量筒、烧杯、层析缸。试剂胡萝 卜、丙酮、石油醚（、硅胶（层析用，目）、无水硫酸钠、石油 bp30~60200~300 C ） 醚（、丙酮：石油醚（）（）。 : bp60~9019V/V C ） 三．实验方案 、含类胡萝卜素石油醚溶液的制备 1 将新鲜胡萝卜洗净、擦干切去尾部，切碎。称取碎鲜胡萝卜【】于小研钵中研 ,110g, 碎。碎胡萝卜移至三角烧瓶中，每次用丙酮萃取次，再用石油醚 50mL10mL2 （）萃取固体两次，每次。把石油醚溶液加到丙酮液中。在分液漏斗中 bp30~6010mL C 将混合液与饱和氯化钠溶液【】振荡，分去下层，用蒸馏水洗涤上层液两次，每 50mL2 次分去水，用无水硫酸钠干燥石油醚液（约）把混合液倒入圆底烧瓶 , 50mL1h,50mL 中，热水浴加热蒸馏，除去溶剂，得固体。在制得的固体物加入石油醚 3mL （）拌硅胶，在通风橱内抽干，得黄色硅胶颗粒，待上柱。 bp60~901g C 、装柱和分离 2 取色谱柱一根，垂直装置，以三角烧瓶作洗脱液的接受器。用镊子取 20cm*1cm50ml 少许脱脂棉【】放于干净的色谱柱底部，轻轻塞紧，再在脱脂绵上盖一层厚的海 30.5cm 石砂（或用一张比柱内径略小的滤纸代替），关闭活塞，向柱内倒入石油醚 （至约为柱高的处，打开活塞，控制流出速度为滴。通过一干燥的 -/ bp6090341/s C ） 玻璃漏斗慢慢加入层析硅胶。用洗耳球轻轻敲打柱身，使填装紧密。当装填到时，再 3/4 在上面加一层厚的海石砂，操作时一直保持上述流速，注意不能使液面低于砂子 0.5cm 的上层。当液面流至离海石砂面时，立即从玻璃漏斗加入已制备好的含胡萝卜素的 1cm 黄色硅胶，随后用石油醚洗下管壁的硅胶，如此连续次，直至洗净为止，然 — 0.5ml23 后在色谱柱上装上滴液漏斗，用石油醚（作洗脱剂进行洗脱，洗滴。 - bp60901/s C ） 当有一黄色的谱带分出，待黄色组分绝大部分洗出时，把洗脱剂换成：丙酮一石油醚 19 （混液作洗脱剂进行洗脱，控制流出速度如前（这混液洗脱剂有助于混合 - bp6090 C ） 物中极性较大的组分移动），又可分出两个黄色组分。在内，柱中物料将全 — 4590min 部洗脱出来。观察这些物料通过柱子的移动情况。在三角烧瓶中收集份洗出液。用纸 3 色谱、薄层色谱对各段洗出液进行色谱分析。 3. 薄层色谱法 样品：柱色谱法中洗脱出的份样品液展开剂：：丙酮一石油醚溶液薄层板的制备：取 19