DSN均一化文库构建介绍

DSN均一化文库构建基于双链特异性核酸酶(Duplex-Specific Nuclease, DSN)的先进cDNA文库均一化技术,能减低高丰度表达基因,有效富集低丰度表达基因,降低冗余率。DSN (

DSN 均一化文库构建 (Duplex-Specific Nuclease, DSN)cDNA 基于双链特异性核酸酶的先进文库均一化 技术,能减低高丰度表达基因,有效富集低丰度表达基因,降低冗余率。 DSN (duplex-specificenzyme) 是近年来发现的一种热稳定核酸酶。该酶能够选择性降解 DNADNA-RNADNA, DSN 双链和杂交体中的对单链核酸分子几乎没有作用。特异降解双 DNA, DNA 链不需要以往复性式均一化过程中靠物理方法分离单双链的步骤。 DSNcDNArRNAtRNA 在均一化处理这一步,首先文库变性后进行复性,,来源的 DNAmRNADSNDNA 分子其复性快于,因此首先被降解。通过各来源的分子的复性速 DSNDNArRNA, 度的不同而进行均一化。均一化处理能够降解掉高丰度的分子来自 tRNA,DNADSN 管家基因,而保留低表达丰度的分子。均一化处理技术具有广泛的应用, poly-A 包括新转录本的发现和注释,缺少尾的细菌转录本的分析,以及福尔马林固定石蜡 RNA 包埋的方法处理的。 3DSNCluster 建库流程需要天。均一化处理在常规样本文库的制备之前这一步。流程 如下: DSN 是均一化处理,会丢失表达量信息。因此信息分析与常规建库的分析相比,没有 基因表达差异分析以及基于表达量的所有分析。

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