(完整word版)实验判断可逆抑制剂为何种类型

问:给定一种抑制剂(I)对某种酶(E)的抑制反应为可逆抑制,设计实验判断该可逆抑制剂为何种类型?答:利用不同浓度抑制存在时,进行E的动力学参数测定实验,并在同一坐标进行双倒数作图,根据曲线之间的关系来

IE 问:给定一种抑制剂()对某种酶()的抑制反应为可逆抑制,设计实验判断该可逆抑制 剂为何种类型? E 答:利用不同浓度抑制存在时,进行的动力学参数测定实验,并在同一坐标进行双倒数 作图,根据曲线之间的关系来进行抑制反应类型的判断。具体做法: 1、 5S 在无抑制剂情况下,设定个不同的底物浓度【】(等差或等比),在酶的最适反应 V 条件下,分别测定各个底物浓度下的反应速度,每个浓度做三次重复; 2、 0.5mol/L15S 用µ的抑制剂进行酶反应抑制,同样在第步设定的个不同【】下,在酶的 IV 最适反应条件下,分别测定有存在时,各个底物浓度下的反应速度,每个浓度做三 次重复; 3、 1mol/L15S 用µ的抑制剂进行酶反应抑制,同样在第步设定的个不同【】下,在酶的 IV 最适反应条件下,分别测定有存在时,各个底物浓度下的反应速度,每个浓度做三 次重复; 4、 V 用上述反应得到的数据(反应速度为三次重复的平均值),在同一坐标内进行双倒数 作图,并根据做出的图进行抑制类型的判断,判断结果如下: 说明:该实验必须做三条以上曲线进行判断,根据计算出的曲线方程,交点或斜 率不一定绝对是同一数值,但差别在统计误差范围内,可认为是相同。因为实验 的误差是不可避免的,实验做得越精确,误差就越小。本方法是常用的简单可靠 地方法 大家的想法理论上都是对的,但未考虑到误差的影响,只有两个数据之间进行比 较,如果误差较大,而且还存在正负两种误差,有可能比较大小时得不到正确的 结果。 还有班级给出同位素标记的方法,在理论上可行,但实际操作困难较大,难度也 较大。

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