酵母双杂交文库筛选与蛋白互作验证服务

酵母双杂交文库筛选与蛋白互作验证服务 酵母双杂交技术是研究蛋白质-蛋白质相互作用的一种蛋白组学方法，是基于对真核生物的转录因子调控转录起始过程的认识而发明的技术。其基本原理是利用真核生物酵母的转

酵母双杂交文库筛选与蛋白互作验证服务 - 酵母双杂交技术是研究蛋白质蛋白质相互作用的一种蛋白组学方法， 是基于对真核生物的转录因子调控转录起始过程的认识而发明的技术。其 Gal4 基本原理是利用真核生物酵母的转录激活因子可分为结构上分开并 N1-147aaDNA 且功能独立的两个结构域：端结合结构域 DNAbindingdomain,BDC768-881aa （）和端转录激活结构域 ActivationDomain,AD)Gal4NC （，的端和端可以分开构建表达质粒， NACcDNA 将端和诱饵蛋白（研究的目标蛋白）融合表达，端和细胞或 XcDNAxA 者猎物蛋白融合表达，如果编码的蛋白能和互相作用，就能 Gal4CNUAS 把的端和端联系在一起，形成转录因子，激活下游的基 1 因表达，原理如图所示。 1(MATCHMAKERGAL4 图酵母双杂交技术原理图引自 Two-HybridSystem3&LibrariesUserManual). 公司选用的是美 ClontechTakaraMatchMaker 国公司（现为公司收购）的系列酵母双杂 AH109Y187 交系统，所用的，酵母菌株，是通过基因工程的方法突变了 Gal4GAL4UASs 内源转录因子的工程菌株，并在和启动子的下游构建 3--ADE2HIS3MEL1LacZ 了个报道基因，，（或），因此可以通过营养 缺陷和显色报告基因的表达来筛选或验证两个蛋白之间是否存在相互作 2 用。菌株信息如图所示。 所用表达载体信息如下 酵母双杂交技术优点：