用gateway技术克隆并表达汉滩病毒g1蛋白itam样基序_医学论文

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用gateway技术克隆并表达汉滩病毒g1蛋白itam样基序_ 医学论文 用Gateway技术克隆并表达汉滩病毒G1蛋白ITAM样基序_医学论文 用Gateway技术克隆并表达汉滩病毒G1蛋白ITAM样基序_医学论文 作者:牟丹蕾，姜泓，王英鹏，李光玉，潘蕾，李新红，王临旭，张 岩，黄长形，白雪帆 【摘要】 目的:克隆并表达汉滩病毒(HTNV)囊膜糖蛋白(G1)胞 质区尾段ITAM样基序及其突变体. 方法:采用RT PCR方法，扩增 HTNV G1蛋白ITAM样基序及其中2个保守酪氨酸残基突变基序编码 基因，应用Gateway技术将目的基因克隆至pDESTTM15表达载体，在 BL21 AI中经L 阿拉伯糖诱导表达，免疫印迹确证融合蛋白的表 达. 结果:成功地构建了2个含汉滩病毒G1胞质区尾段ITAM样基序 编码序列表达载体pDEST ITAM L，pDEST ITAM和1个含保守 酪氨酸残基突变的G1 ITAM样基序编码序列表达载体pDEST ITAM YY FF (Y615F，Y628F)，并在大肠埃希杆菌中得到高效表达， 免疫印迹证实目的蛋白与GST融合表达. 结论:获得了3种与谷胱甘 肽S 转移酶(GST)融合的G1 ITAM样基序及其突变基序的重组 蛋白, 为进一步探讨HTNV G1蛋白ITAM样基序在HFRS免疫信号传递 中的作用奠定了基础. 【关键词】 汉坦病毒; 囊膜糖蛋白类; 免疫受体酪氨酸活化基序 【Abstract】 AIM: To clone and express wild type G1 ITAM like sequence containing constructs and tyrosine mutated G1 ITAM like sequence constructs of Hantaan virus. METHODS: