食品中微量铁的测定实验指导

实验四 邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1、掌握分光光度计的使用方法和测定原理。2、掌握标准曲线的绘制方法（绘图法、回归法）。二、实验原理在pH2-9的溶液中，二价铁离子能与邻二氮菲生成稳

实验四邻二氮菲分光光度法测定微量铁 一、实验目的 1 、掌握分光光度计的使用方法和测定原理。 2 、掌握标准曲线的绘制方法（绘图法、回归法）。 、实验原理 二 在pH2-9的溶液中，二价铁离子能与邻二氮菲生成稳定的橙红色络合物，在 510nm有最大吸收，其吸光度与铁的含量成正比，故可比色测定。反应式如下： pH＜2时反应进行较慢，而酸度过低又会引起二价铁离子水解，故反应通常在 pH＝5左右的微酸条件下进行。 三、仪器和试剂 1、仪器：721或722型分光光度计 2、试剂 (1) 10％盐酸羟胺溶液（新配） (2) 0.12％邻二氮菲水溶液：避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用 (3)1mol／L盐酸溶液 (4) 10％醋酸钠溶液 （5）铁标准贮备液：1000μg /mL。准确称取1.000g纯金属铁溶于1+1盐酸 50mL中，用水稀释定容至1000mL。（也可用硫酸亚铁配制。准确称取4.979g硫酸 L 亚铁(FeSO4·7H2O)溶于l00m水中，加入5mL浓硫酸微热溶解，用水定容至 l000mL，摇匀，得标准贮备液） （6）铁标准工作液：10μg /mL。吸取铁标准贮备液10mL，定容至1000mL。 四、实验步骤 ①样品处理：称取均匀样品10.0g，干法或湿法消化后，加入2mL1+1盐酸， 在水浴上蒸干，再加入5mL蒸馏水，加热煮沸后移入100mL容量瓶中，以水定容， 混匀。