实验3-微生物接种技术资料

实验三 微生物接种技术一、实验目的1、掌握无菌操作在微生物接种过程中的重要性。2、掌握几种常用的微生物接种方法。3、掌握微生物微生物扩大繁殖的基本方法。4、认识微生物接种工具二、实验原理 微生物接

实验二微生物接种技术 实验三 微生物接种技术 、实验目的 一 1 、掌握无菌操作在微生物接种过程中的重要性。 2 、掌握几种常用的微生物接种方法。 3 、掌握微生物微生物扩大繁殖的基本方法。 4 、认识微生物接种工具 二、实验原理 微生物接种技术是生物科学研究中最基本的操作技术。由于实验目的、培养基种类及容 器等不同，所用接种方法不同，如斜面接种、液体接种、固体接种和穿刺接种等，以获得生 长良好的纯种微生物。为此，接种必须在一个无杂菌污染的环境中进行严格的无菌操作；同 时，因接种方法的不同，常采用不同的接种工具，如接种针、接种环、移液管和玻璃刮铲等。 三、实验器材 主要仪器及设备 无菌室、超净工作台、培养箱、振荡器、接种针、接种环、接种钩、 PDA- 接种铲，试管固体斜面培养基、培养基平板、三角瓶液体培养基，平板及斜面，牛肉膏 -- 蛋白胨琼脂平板、斜面培养基、牛肉膏蛋白胨液体培养基、试管半固体培养基。 Escherichia coliPenicillium spSaccharomyces ． 菌种 )()( 大肠杆菌（、青霉、酿酒酵母 cerevisiaeStreptomyces microflavus Hansen)() 、细黄链霉菌放线菌等。 四、操作步骤 (一)斜面接种技术具体操作如下： 1、贴标签 接种前在试管上贴上标签，注明菌名、接种日期、接种人姓名等。贴在距试 管口径2-3厘米的位置。 2、点燃酒精灯 。 3、接种 用接种环将菌种移接到贴好标签的试管斜面上。无菌操作程序简述如下： ⑴手持试管 将菌种和用于接种的斜面两支试管用大拇指和其他四指握在左手中、使中 指位于两试管之间。斜面向上，并使它们位于水平位置(图a)。 ⑵旋松棉塞 先用右手将棉塞旋松，以便接种时易于拔出。 ⑶取接种环 右手拿接种环在火焰将环端烧红灭菌，然后将有可能伸入试管的其余部分， 均用火烧过灭菌。 ⑷拔棉塞 用右手的无名指、小指和手掌边先后拔出试管的棉塞，然后让试管口缓缓过 火灭菌(切勿烧得过烫)，如图b、c所示。 ⑸环冷却 将灼烧过的接种环伸入菌种管，先使环接触没有长菌的培养基部分，使其冷 却。 ⑹取菌种 待环冷却后轻轻沾取少量菌或孢子，然后将接种环移出接种管，如图d所示， 注意不要使环的部分碰到管壁，取出后不可使环通过火焰。 1