实验3细菌的简单染色和革兰氏染色_基础生物学实验(安徽大学研究生复试用,生物+生命科学)

实验三 细菌的简单染色和革兰氏染色一、实验目的1.学习微生物的涂片、染色和基本操作技术。2.掌握微生物的简单染色、革兰氏染色的基本原理和方法。3.初步认识细菌的形态特征。二、实验原理染色是细菌学中的

实验三细菌的简单染色和革兰氏染色 一、实验目的 1.学习微生物的涂片、染色和基本操作技术。 2.掌握微生物的简单染色、革兰氏染色的基本原理和方法。 3.初步认识细菌的形态特征。 二、实验原理 染色是细菌学中的一项重要的基本操作技术。由于微生物与各种性质的染料 具有一定的亲和力，从而使微生物着色，着色后的菌体折光性弱，色差明显。在显 微镜下容易观察细胞的内部结构及其内含物，因此，微生物染色是进行微生物形态 观察的重要方法之一。染色分为单染（简单染色），复染（革兰氏染色）。单染较 简单，以同一种染料让菌体着色，以显示微生物的形态。革兰氏染色法的基本步骤 是：先用初染剂结晶紫进行染色，再用碘液媒染，然后用乙醇（或丙酮）脱色，最 后用复染剂（如沙黄）复染。经此方法染色后，细胞保留初染剂蓝紫色的细菌为革 兰氏阳性菌；如果细胞中初染剂被脱色剂洗脱而使细菌染上复染剂的颜色（红 色），该菌属于革兰氏阴性菌。 1884年由丹麦病理学家C.Gram创立了革兰氏染色法，后来一些学者在此基 础上作了某些改进。革兰氏染色法是细菌学中最重要的鉴别染色法。 革兰氏染色法将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性，是由这两类细菌细胞壁 的结构和组成不同决定的。实际上，当用结晶紫初染后，像简单染色法一样，所有 细菌都被染成初染剂的蓝紫色。碘作为媒染剂，它能与结晶紫结合成结晶紫-碘的 复合物，从而增强了染料与细菌的结合力。当用脱色剂(乙醇)处理时，两类细菌的 脱色效果是不同的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成、 壁厚、含脂量低，用乙醇（或丙酮）脱色时细胞壁脱水、使肽聚糖层的网状结构孔