醋酸纤维素薄膜电泳分离及定量测定血清蛋白成分

醋酸纤维素薄膜电泳分离及定量测定血清蛋白成分一、实验目的 1(掌握醋酸薄膜电泳的原理及操作。 2(定量测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。 3(掌握分光光度计的原理及操作 二、实验原理 采用醋酸纤维

醋酸纤维素薄膜电泳分离及定量测定血清蛋白成分 一、实验目的 1(掌握醋酸薄膜电泳的原理及操作。 2(定量测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。 3(掌握分光光度计的原理及操作 二、实验原理 采用醋酸纤维薄膜为支持物的电泳方法，叫做醋酸纤维素薄膜电泳。醋酸纤维 素，是纤维素的羟基乙酰化所形成的纤维素醋酸酯。将它溶于有机溶剂(如:丙酮、 氯仿、氯乙烯、乙酸乙酯等)后，涂抹成均匀的薄膜则成为醋酸纤维素薄膜。该膜 具有均一的泡沫状的结构，有强渗透性，厚度约为120μm。 醋酸纤维素薄膜电泳是近年来推广的一种新技术。它具有微量、快速、简便、 分辨力高、对样品无拖尾和吸附现象等优点。该技术已广泛应用于血清蛋白、糖蛋 白、脂蛋白、结合球蛋白、同功酶的分离和测定等方面。目前，醋酸纤维薄膜电泳 趋向于代替纸电泳。 四、试剂和器材 (一)试剂 (1)新鲜血清——无溶血现象。 (2)巴比妥——巴比妥钠缓冲液(pH8.6，0.07M，离子强度0.06):称取巴比妥 1.66g和巴比妥钠12.76g，溶于少量蒸馏水后定容1 000ml。 ?(3)染色液:称取氨基黑10B 0.5g，加入蒸馏水40ml，甲醇50ml和冰乙酸 10ml，混匀，在具塞试剂瓶内贮存。 (4)漂洗液?:取95,乙醇45ml，冰乙酸,ml和蒸馏水50ml。混匀，在具塞试 剂瓶内贮存。[易挥发、密封]