家族性急性髓系白血病差异表达基因的筛选

家族性急性髓系白血病差异表达基因的筛选　 作者：王少元， 张轶文， 王程毅 ‘【摘要】 目的建立简便可靠的非同位素杂交筛选方法，筛选家族性急性髓系白血病cDNA消减文库中的差异表达基因。方法用地高辛

家族性急性髓系白血病差异表达基因的 筛选 作者：王少元，张轶文，王程毅‘ 【摘要】目的建立简便可靠的非同位素杂交筛选方法，筛选家族性 急性髓系白血病cDNA消减文库中的差异表达基因。方法用地高辛 （DIG）标记消减文库cDNA作为探针，通过差异筛选技术进行差异表 达片段的筛选，杂交阳性结果经RTPCR再度验证。结果DIG标记探 针浓度为250～500pg/μL，效率为48%～96%，并且杂交信号清晰， 重现性好。应用DIG标记探针改良的差异筛选技术所得到的阳性结果 经RTPCR验证符合率达到86%。结论采用DIG标记探针具有高度的 灵敏度和良好的特异性，可避免放射性污染，简化实验操作，可作为 替代同位素32PdCTP标记探针的方法。 【关键词】系谱,白血病；急性病；基因表达；地高辛；DNA， 互补；基因文库 经抑制性消减杂交（suppressionsubtractivehybridization， SSH）技术构建的cDNA消减文库，包含着丰富的差异表达信息，是研 究疾病发生发展分子机制的重要信息来源。但是，如何从浩瀚的信息 库中筛选出有价值的差异表达基因，要求有一种简便、实用、快速、 可靠的筛选技术，该技术不仅要有高效的筛选效率，而且应具有高度