盐酸小檗碱有关物质检查分析方法优化及存在问题探讨

盐酸小檗碱有关物质检查分析方法优化及存在问题探讨摘要 目的：建立盐酸小檗碱有关物质检查的分析方法，并对中国药典分析方法 中存在的问题进行讨论。方法：采用反向高效液相色谱法测定盐酸小檗碱有关物 质。色谱

盐酸小檗碱有关物质检查分析方法优化及存在问题探讨 摘要目的：建立盐酸小檗碱有关物质检查的分析方法，并对中国药典分析方法中 存在的问题进行讨论。方法：采用反向高效液相色谱法测定盐酸小檗碱有关物质。 WatersXTerraC18（4.6x250mm5|im）0.05mol/L 色谱柱为柱,；流动相为磷 （pH2.8）（78:22,V/V）345nm 酸二氢钾用磷酸调节值至和乙腈；检测波长为； 25101.0ml/min 柱温为；进样量为山；流速为。结果：在该色谱条件下，盐酸 C 71.52（ 小檗碱主峰与个杂质峰的分离度均大于，个已知杂质盐酸药根碱和盐酸 ）2.5ng4.9ng0.1ng0.2ng 巴马汀的定量限分别为和,检测限分别为和；平均回 100.0%102.7%1.06 收率分别为和；与盐酸小檗碱的相对校正因子分别为和 1.050.5~20ml（r>0.999） ；在曲/浓度范围内，线性关系良好。重复性、中间精 RSD2.0% 密度的值均小于且耐用性符合要求。结论：该方法专属性强,准确度高, 适用于盐酸小檗碱的有关物质检测。 关键词盐酸小檗碱；有关物质；杂质来源；高效液相色谱法 盐酸小檗碱最早是从中药黄连中提取得到的一种生物碱，又名盐酸黄连素，在 ［1-3］ 小檗科、毛莨科和防己科等植物中广泛存在。其对痢疾杆菌、肺炎球菌、 金黄色葡萄球菌、链球菌、伤寒杆菌、白喉杆菌、霍乱孤菌、脑膜炎奈瑟菌和志贺 菌属等具有较强抑制作用，对阿米巴原虫也有一定作用，临床主要用于痢疾杆菌、 ［4-5］ 大肠杆菌等导致的肠道感染。 1963 盐酸小檗碱质量标准最早收录于年版中国药典，其有关物质检测方法为 TLC2010TLCHPLC 法，直到中国药典年版，才将有关物质检测方法由法变更为 0.01mol/L（pH 法。变更后的有关物质测定方法采用磷酸二氢铵溶液用磷酸调节值 2.8）-（75:25） 至乙腈为流动相，并规定已知杂质盐酸药根碱和盐酸巴马汀含量不 1.0%2.0%［6-7］ 超过，其它未知杂质不超过。经研究发现，中国药典中盐酸小 檗碱有关物质检查方法受样品来源、流动相比例、色谱柱品牌型号、样品水分含量 等因素影响，会导致测定结果偏离真实值，不利于产品质量的有效控制。本文在中 国药典有关物质测定方法的基础上，对色谱条件进行优化，细化实验操作，结果表 明优化后的分析方法更加准确、可靠，能有效解决中国药典方法中存在的问题。 1 仪器与试药 1.1 仪器 Agilent1260（）Agilent1260 高效液相色谱仪美国安捷伦公司，二极管阵列 WatersXTerraC18（4.6x250mm5|im）LCOpenlab 检测器，色谱柱，，色 1.2 谱数据工作站。试药 （） 盐酸小檗碱原料药，提取品，四川协力制药有限公司提供；盐酸小檗碱 （） 原料药，合成品，东北制药集团股份有限公司提供；盐酸小檗碱对照品、盐酸 （）（ 药根碱对照品和盐酸巴马汀对照品中国食品药品检定研究院提供；乙腈色谱 ）（） 纯，默克公司提供；磷酸二氢铵分析纯，国药集团股份有限公司提供。 2 分析方法 对照品溶液配制：精密称取盐酸小檗碱对照品、盐酸巴马汀对照品和盐酸药根 1ml20 碱对照品各适量，加流动相溶解并稀释制成每中约含盐酸小檗碱曲、盐酸 1010 巴马汀憾和盐酸药根碱憾的混合溶液。 25mg25ml 供试品溶液配制：取本品约，置容量瓶中，加流动相适量，超声 10min 使主成分溶解，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品