胃蛋白酶效价测定实验方案

胃蛋白酶检验用试剂: 盐酸、酪氨酸、胃蛋白酶、三氯醋酸、牛血红蛋白酪氨酸烘干至恒重（105℃）、试管（16支/组，至少12支/组，最少8支试管）试液的配制：1mol/L盐酸溶液：90ml盐酸，加水稀释

胃蛋白酶 : 检验用试剂盐酸、酪氨酸、胃蛋白酶、三氯醋酸、牛血红蛋白 105℃16/12/8 酪氨酸烘干至恒重（）、试管（支组，至少支组，最少支试管） 试液的配制： 1mol/L90ml1000ml500ml 盐酸溶液：盐酸，加水稀释并定容至。（配） 1mol/L65ml1000ml1000ml 盐酸溶液：取盐酸溶液，加水至。（每组各配） 5%600ml 三氯醋酸溶液：配 600ml20ml 血红蛋白试液：配（每组至少） 1g(1mol/L65ml,1000ml) 血红蛋白试验取牛血红蛋白，加盐酸溶液取盐酸溶液加水至使 100ml2 溶解成，即得。本液置冰箱中保存，日内使用。 对照品 供试品 供试品的空白对 对照品的空白对 照 照 试管编号 123 、、 456 、、 7 8 对照品溶液 1.0ml 供试品溶液 1.0ml 水浴保温 37℃±0.5℃5 水浴中，保温分钟 预热的血红蛋白 37℃±0.5℃5ml37℃±0.5℃ 加入预热至的血红蛋白试液，摇匀，在水浴中反 试液 10 应分钟 5%5ml 加入三氯醋酸溶液摇匀 1ml 供试品溶液 1ml 盐酸溶液 摇匀，滤过，取续滤液备用 275nm 的波长处测定吸收度 1g3800 本品系自猪、羊或牛的胃黏膜中提取的胃蛋白酶。每中含蛋白酶活力不得少于单位。 105℃ 【效价测定】对照品溶液的制备精密称取经干燥至恒重的酪氨酸适量，加盐酸溶液 1mol/L65ml1000ml1ml0.5mg 〔取盐酸溶液，加水至〕制成每中含的溶液。 1ml0.20.4 供试品溶液的制备取本品适量，精密称定，用上述盐酸溶液制成每中约含～ 单位的溶液。 631ml3 测定法取试管支，其中支各精密加入对照品溶液，另支各精密加入供试品 1ml37℃±0.5℃537℃±0.5℃ 溶液，置水浴中，保温分钟，精密加入预热至的血红蛋白试液 5ml37℃±0.5℃105% ，摇匀，并准确计时，在水浴中反应分钟。立即精密加入三氯醋酸溶 5ml25ml 液，摇匀，滤过，取续滤液备用。另取试管支，各精密加入血红蛋白试液，置 37℃±0.5℃1055ml1 水浴中保湿分钟，再精密加入％三氯醋酸溶液，其中支加供试品溶液 1ml11ml ，另支加上述盐酸溶液，摇匀，滤过，取续滤液，分别作为供试品和对照品的 ⅣA275nmS 空白对照，照分光光度法（附录）在的波长处测定吸收度，算出平均值Ａ和 Ａ，按下式计算。 ×× ＡＷｓｎ 1g()───────────── 每含蛋白酶活力单位＝