体外内层血视网膜屏障模型中Müller胶质细胞对紧密连接的影响

体外内层血视网膜屏障模型中Müller胶质细胞对紧密连接的影响　　【摘要】 建立体外内层血视网膜屏障（iBRB）模型并研究视网膜Müller胶质细胞（RMGC）对紧密连接（TJ）的影响。 方法：采用免

体外内层血视网膜屏障模型中Müller 胶质细胞对紧密连接的影响 【摘要】 建立体外内层血视网膜屏障（iBRB）模型并研究视网 膜Müller胶质细胞（RMGC）对紧密连接（TJ）的影响。 方法：采 用免疫磁珠方法原代纯化和培养大鼠视网膜微血管内皮细胞 （RMEC），采用改良酶消化方法培养RMGC，RMEC和RMGC在微孔膜的 两侧共培养建立iBRB模型，通过相差显微镜和透射电子显微镜（TEM） 观察两种细胞的生长和TJ的形态。采用跨内皮细胞电阻（TER）测量 和TJ相关蛋白ZO-1荧光染色和蛋白电泳来评价TJ的变化情况。结 果：RMEC和RMGC均可在膜上正常生长，RMGC间紧密连接。TEM观察 高TER值样品中相邻RMEC形成典型的TJ结构。RMEC层TER在8d时 达到最高，为(86.3±7.9) Ω·cm2，此后保持相对稳定。在RMGC存 在的共培养组TER 7d时为 (97.6±3.6) Ω·cm2，约为7d时RMEC 组的2倍，8 d达到峰值(113.5±5.3) Ω·cm2。在iBRB模型发展 过程中，ZO-1的表达强度随时间延长而增加。 结论：通过RMEC和 RMGC的共培养可以建立体外iBRB模型，RMGC加快RMEC间的TJ成 熟。 【关键词】 视网膜 0引言