三酶偶联全细胞生物合成L-酪氨酸

三酶偶联全细胞生物合成L-酪氨酸陈明亮1，张利坤1，杨卫华1，唐云平2，肖延铭1 *（1.长兴制药股份有限公司，浙江 长兴313100；2.浙江海洋大学 食品与医药学院，浙江 舟山316022）摘要:

L- 三酶偶联全细胞生物合成酪氨酸 111211* 陈明亮，张利坤，杨卫华，唐云平，肖延铭 1.3131002. （，；， 长兴制药股份有限公司浙江长兴浙江海洋大学食品与医药学院浙江舟山 316022 ） AldolaseALDD-D-SerineDehydrataseSDH 通过将醛缩酶（，）、丝氨酸脱水酶（，）和酪氨酸酚裂解 摘要: TyrosinePhenol-LyaseTPLL-L-TyrosineL-Tyr 酶（，）三酶偶联，催化甘氨酸、甲醛和苯酚合成酪氨酸（，）。 L-Tyr…… 并以的质量浓度为指标对转化工艺进行了考察。经考察确定了结果表明，三酶偶联最佳反应条 pH=8.535℃6g/L0.1g/LPLPPLP 件为：，温度，乙酸铵、磷酸吡哆醛（），三种酶细胞质量配比 (ALD∶SDH∶TPL)6∶3∶550g/L10000L11h 为。当甘氨酸加量为，利用上述工艺进行放大转化验证，反应， L-Tyr117g/L97%4% 质量浓度可达，转化率苯酚转化率为，转化体系放大后转化率苯酚转化率提高，收 85%L-TyrL-Tyr 率为。三酶偶联生物法合成直接将底物甘氨酸、甲醛和苯酚经酶催化反应获得，节省了 D- 丝氨酸和丙酮酸铵的提取步骤，对资源的合理利用以及对绿色合成工艺的开发具有重要的参考意义。 D-L- 关键词： 酶偶联；醛缩酶；丝氨酸脱水酶；酪氨酸酚裂解酶；酪氨酸 BiosynthesisofL-TyrosinewithAldolase,D-Serine DehydrataseandTyrosinePhenol-Lyase 1112 CHENMing-liangZHANGLi-kunYANGWei-huaTANGYun-pingXIAO ，，，， 1* Yan-ming 1.ChangxingPharmaceuticalCO.,LTD,Changxing313100,Zhejiang,China2.CollegeofFoodScienceand （ ; Pharmaceutics,ZhejiangOceanUniversity,Zhoushan316022,Zhejiang,China ） Abstract: WeusedmultienzymecoupledcatalysistoproduceL-Tyrosine(L-Tyr).Inthisstudy, GlycinewascatalyzedtosynthesizeD-SerinebyAldolase(ALD),andD-Serinewastransferred topyruvicacidammoniumbyD-SerineDehydratase(SDH).Then,L-Tyrwassynthesizedby TyrosinePhenol-Lyase(TPL)whenthesubstratephenolwasaddedintothereactionsystem.The optimalreactionconditionswereshownasfollows:pH=8.5,35℃,6g/Lofammoniumacetate, 0.1g/LofPLP,m(ALD):m(SDH):m(TPL)=6:3:5.Weusedtheaboveconditionstocatalyze glycineattheconcentrationof50g/Lfor11h,theconcentrationofL-Tyrwas117g/Lwith aconversionof97%,increasingby4%comparedwithsmall-scaletestandtheyieldreached 85%.ThemethodofbiosynthesisofL-Tyrcannotonlyeliminatethepurificationprocessof 2018-0-02018-0-0DOI;10.13550/j.jxhg.20180151 1收稿日期：;定用日期：； 1990-E-mail:976608463@qq.com 作者简介：陈明亮（），男，助理工程师，。 1986-E-mail:hrbxym1286@yeah.net 通讯作者：肖延铭（），男，硕士，研发中心主任，。 1