线粒体基因MTATP6 MTATP8变异与2型糖尿病相关性研究

温州医学院硕士学位论文【50]．Marina Matfiazzi，ChetanⅥjayvergiya,Carl D．Gajewski．The mtDNA T8993G刚Al冲) mutation re

线 粒 体 基 因 M T A T P 6 、 t ／ T A T P 8 温 州 医 学 院 硕 士 学 位 论 文 ( 国 家 自 然 科 学 基 变 异 与 2 型 糖 尿 病 相 关 性 研 究 金 资 助 项 目 ： N 0 3 0 4 7 0 9 5 8 ) 中 文 摘 要 目 的 2 d i a b e t e s m e l l i t u s ， T 2 D M ) 患 者 线 粒 体 D N A 1 ． 分 析 2 型 糖 尿 病 ( t y p e ( m i t o c h o n d r i a l D N A ， m t D N A ) 基 因 M T A T P 6 ， M T A T P 8 的 变 异 ， 以 期 从 分 子 水 平 研 究 该 基 因 片 段 变 异 与 T 2 D M 的 相 关 性 。 2 ． 分 析 M T A T P 6 ， M T A T P 8 基 因 变 异 与 T 2 D M 慢 性 并 发 症 之 间 的 相 关 性 ， 为 T 2 D M 及 其 并 发 症 的 遗 传 危 险 因 素 评 估 提 供 参 考 ． 方法 1 ． 根 据 1 9 9 9 年 W H O 糖 尿 病 诊 断 标 准 ， 选 取 浙 江 籍 汉 族 人 群 中 确 诊 为 T 2 D M 的 无血缘关系患者254名。同时收集具有母系遗传特征的糖尿病家系，对所有患 者作常规生化指标检测并记录基本l临床资料。165名年龄匹配的健康体检者 作为正常对照，排除高血压、高脂血症、脑血管病、糖尿病及家族史、口服葡 萄 糖 耐 量 异 常 者 。 2 ． 提 取 所 有 受 试 者 全 血 基 因 组 D N A ， 采 用 P C R 扩 增 M T A T P 6 ， M T A T P 8 ， 直 接 R e f e r e n c e 序 后 与 剑 桥 参 考 序 列 ( r e v i s e d 测 C a m b r i d g e S e q u e n c e ， r C R S ) 进 行 比 根据测序峰图，对可能存在的异质性变异采用变性高效液相色谱 对 。 (denaturing h i g h p e r f o r m a n c e l i q u i d c h r o m a t o g r a p h y ， D H P L C ) 技 术 证 实 。 X 及 蛋 白 相 关 数 据 库 ， 从 氨 基 酸 变 异 情 况 、 蛋 白 3 ． 借 助 生 物 信 息 学 软 件 C l u s t a l 结 构 分 析 M T A T P 6 、 M T A T P 8 变 异 ， 并 结 合 统 计 学 方 法 分 析 M T A T P 6 ， M T A T P 8 变 异 与 T 2 D M 及 其 慢 性 并 发 症 的 相 关 性 。