(完整版)细胞生物学实验测试题
细胞生物学实验测试题试述荧光显微镜的原理和用途。(并操作)原理:荧光显微镜是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。(滤光镜片:获得所需波长的激
细胞生物学实验测试题 1、 试述荧光显微镜的原理和用途。(并操作) 原理 :荧光显微镜是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发 出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。 (滤光镜片:获得所需波长的激发光;光源:高压汞灯) 用途 :荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布 及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另 有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经 紫外线照射亦可发荧光,荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究 的工具之一。 2、 试述酸性磷酸酶显示法的原理及主要步骤。 原理 :酸性磷酸酶(ACP)是溶酶体的标志酶,通常酸性磷酸酶在pH 为5左右时发挥作用能水解磷酸酯而释放出磷酸基,PO43-与底物中硝酸 铅反应生成磷酸铅沉淀物。由于这些沉淀物是无色的,需再与黄色的硫化 铵反应,生成棕黄色到棕黑色的硫化铅沉淀而被显示出来。其反应过程如 下: β-甘油磷酸钠+酸性磷酸酶→甘油+PO43- PO43-+Pb(NO3)2 →Pb3(PO4)2↓ Pb3(PO4)2+(NH4)2S →PbS↓(棕黑色) 主要步骤: 1、 前处理:获取小白鼠或大白兔腹腔液(猪肝) 2、 制片: (1)、将腹腔液(肝细胞悬液)滴一滴于冰冻的干净载玻片上,用牙 签涂开,自然干燥。 (2)、放入10%中性福尔马林固定液中固定30min。 (3)、蒸馏水中漂洗,3-5次。 (洗去固定液) (4)、磷酸酶作用液,37°C,30Min。 (5)、蒸馏水中漂洗3次,5min一次。(洗去游离铅离子) (6)、1%硫化铵处理(3-5min); (7)、吉姆沙染液复染15min;(使细胞核、轮廓显示出来) (8)、制片观察。 结果:阳性细胞内有大小不等的棕色或棕黑色的颗粒即为酸性磷酸酶。 对照实验:标本放入作用液前先用高温(50℃)处理 30min,使酶失去活 性,做好标记,其他步骤相同。 3、 试述DNA的Feulgen染色法的原理及主要步骤。 原理 :DNA经稀盐酸(1mol/L HCL溶液)处理后,可使嘌呤碱与脱氧

