(完整版)细胞生物学实验测试题

细胞生物学实验测试题试述荧光显微镜的原理和用途。（并操作）原理：荧光显微镜是以紫外线为光源， 用以照射被检物体， 使之发出荧光， 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。（滤光镜片：获得所需波长的激

细胞生物学实验测试题 1、 试述荧光显微镜的原理和用途。（并操作） 原理 ：荧光显微镜是以紫外线为光源， 用以照射被检物体， 使之发 出荧光， 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。 （滤光镜片：获得所需波长的激发光；光源：高压汞灯） 用途 ：荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布 及定位等。 细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另 有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经 紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究 的工具之一。 2、 试述酸性磷酸酶显示法的原理及主要步骤。 原理 ：酸性磷酸酶（ACP）是溶酶体的标志酶，通常酸性磷酸酶在pH 为5左右时发挥作用能水解磷酸酯而释放出磷酸基，PO43-与底物中硝酸 铅反应生成磷酸铅沉淀物。由于这些沉淀物是无色的，需再与黄色的硫化 铵反应，生成棕黄色到棕黑色的硫化铅沉淀而被显示出来。其反应过程如 下： β-甘油磷酸钠+酸性磷酸酶→甘油+PO43- PO43-+Pb(NO3)2 →Pb3(PO4)2↓ Pb3(PO4)2+(NH4)2S →PbS↓(棕黑色) 主要步骤： 1、 前处理：获取小白鼠或大白兔腹腔液（猪肝） 2、 制片： （1）、将腹腔液（肝细胞悬液）滴一滴于冰冻的干净载玻片上，用牙 签涂开，自然干燥。 （2）、放入10%中性福尔马林固定液中固定30min。 （3）、蒸馏水中漂洗,3-5次。 （洗去固定液） （4）、磷酸酶作用液，37°C，30Min。 （5）、蒸馏水中漂洗3次，5min一次。（洗去游离铅离子） （6）、1%硫化铵处理（3-5min）; （7）、吉姆沙染液复染15min;（使细胞核、轮廓显示出来） （8）、制片观察。 结果：阳性细胞内有大小不等的棕色或棕黑色的颗粒即为酸性磷酸酶。 对照实验：标本放入作用液前先用高温（50℃）处理 30min，使酶失去活 性，做好标记，其他步骤相同。 3、 试述DNA的Feulgen染色法的原理及主要步骤。 原理 ：DNA经稀盐酸（1mol/L HCL溶液）处理后，可使嘌呤碱与脱氧