01248787438397271_沈辰_枝状枝孢霉MD2中紫杉醇合成相关候选基因A10182和A10251的超表达分析

紫杉醇作为一种高效、广谱的抗癌药物，它在内生真菌中的含量直接决定了该菌株的药用价值。HPLC法通常作为检测紫杉醇的基本方法，常用于定量分析紫杉醇含量。可根据保留时间判断是否含有紫杉醇和紫杉烷类代谢产物

紫杉醇作为一种高效、广谱的抗癌药物，它在内生真菌中的含量直接决定了 HPLC 该菌株的药用价值。法通常作为检测紫杉醇的基本方法，常用于定量分析 [4]10- 紫杉醇含量。可根据保留时间判断是否含有紫杉醇和紫杉烷类代谢产物。 10-deacetylpaclitaxel10-DAP 去乙酰紫杉醇（，）是理想的紫杉醇半合成前体，而 7--10-7-Xylosyl-10-deacetylpaclitaxel10-DAXP 木糖基去乙酰紫杉醇（，）可以转 10-Docetaxel 化为去乙酰紫杉醇。多烯紫杉醇（）是紫杉醇的衍生物，通过干扰 细胞有丝分裂和分裂间期细胞功能所必须的微管网络而具有抗肿瘤作用。本章研 HPLCMD2A10182-MD2 究我们利用高效液相色谱技术（）对过表达枝霉菌株、 A10251-MD210- 所含有的紫杉醇、及紫杉醇前体巴卡亭Ⅲ、去乙酰巴卡亭Ⅲ、 7--10-10- 木糖基去乙酰紫杉醇、去乙酰紫杉醇、多烯紫杉醇的含量进行检测，考 MD2MD2 察这些成分在过表达菌株中的含量情况及对照野生型菌株的变化， 为后期的实验提供基础。 PDLPDA 、培养基的配方同第三章。 4.1 表仪器概览 Table4.1Instrumentoverview 仪器名称 生产厂家 1200Series 安捷伦高效液相色谱仪 安捷伦科技有限公司 KQ-500E 型超声波清洗仪 昆山市超声仪器有限公司 Southern 电泳仪 BIO-RAD 美国公司 METTLERTOLEDO 分析天平 瑞士奥然科技有限公司 上海亚荣生化仪器厂 SHZ- Ⅲ循环水真空泵 上海亚荣生化仪器厂 RE-52 型旋转蒸发器 干燥箱 上海精宏实验设备有限公司 分子杂交仪 上海乔枫实业有限公司 水浴锅 上海一恒科学仪器有限公司 成像系统 Synoptics 美国公司 QuantStudio5PCR 荧光定量 赛默飞世尔科技有限公司 赛默飞世尔科技有限公司 Nanodrop2000 1 （）购置 所有标准品均购自上海源叶生物科技有限公司；茉莉酸甲酯购自上海金穗生 物科技有限公司；色谱甲醇购自成都市科隆化学品有限公司；色谱乙腈购自赛默 1