酚类和木质素

3.1.3 酚类化合物含量测定自由态和β-葡萄糖苷酶水解后酚类化合物含量的测定，参照Raskin等（1989）的方法并加以改进。取1 g冻样，用液氮研磨成粉末后加入3 mL 100 %甲醇，用超声波处

植物科学最前沿微信公众号分析提供，严谨任何商用，仅限内部交流使用 3.1.3 酚类化合物含量测定 β-Raskin1989 自由态和葡萄糖苷酶水解后酚类化合物含量的测定，参照等（） 1g3 mL 100 % 的方法并加以改进。取冻样，用液氮研磨成粉末后加入甲醇， 10 min4℃ 12000 g15 min3 用超声波处理，于离心。吸取上清液后，沉淀用 mL 100 %4℃ 1500 g10 min 甲醇溶解，再次离心，合并上清液。再于离心， 5mL40℃3 mL ddHO80℃ 从中吸取上清液在进行旋转蒸干。干燥物用在溶解 2 10 min1 mL2.5 mL-1 。样品分为两份。取一份样品（）加入乙酸乙酯环己烷（： 150 μL HCl ）和萃取（剧烈振荡），收集上层液体并用氮气吹干，干燥物溶于 1mL 100 %1 mL 甲醇中，用于自由态酚类化合物测定。取另一份样品（）加入 1mL almond β-glucosidase3U/ mL37℃6 h2.5mL （），于温育，然后加入乙酸 -1150 μL HCl 乙酯环己烷（：）和萃取（剧烈振荡），收集上层液体并用氮气 1mL 100 %β- 吹干，干燥物溶于甲醇中，用于葡萄糖苷酶水解后酚类化合物测 定。 WatersPinnacleⅡ 高效液相色谱仪（公司生产）检测参数：液相色谱柱用 C150×4.6 mm5 μm320 nmUV200- 柱（，），紫外检测器，检测波长，范围 18 -1 400 nm1 mL min30℃25℃Bellés2008 ，流速，柱温，样温。检测程序（等，）： 20 min1 %A100 % 线性坡度，由乙酸（流动相，溶于水）直到甲醇（流动相 B0.45 μm ）。上样溶液先通过尼龙膜过滤。 BruceWest19898 木质素含量的测定参照和（）的巯基乙酸法进行。取苗龄周 0.5 g2 mL25℃ 12000 g 植株的花茎，用液氮研磨成粉末，加入无水乙醇，于离 30 min12 h5 mL 2N 心，去除大部分上清液后，室温干燥沉淀物。然后，加入 HCl0.5 mL15ml95℃8 h 和巯基乙酸（要用圆底离心管），于加热（在二楼平台 4℃ 12000 g30 min2.5 mL dd 的通风厨里）后冰浴冷却，于离心。取沉淀加入 HO4℃ 12000 g5 min5 mL 1N NaOH25℃ ，再次离心。用悬浮沉淀物，置于下 2 18 h25℃ 12000 g30 min ，其间轻轻搅动几次。离心后，取上清液（取多少？）， 1mL HCl4℃4℃ 12000 g30 min3 加入。沉淀过夜后，于离心，取沉淀物，再加 mL 1N NaOH1 NNaOHOD 溶解沉淀。用作空白对照，测定吸光值，即为相 280 对木质素含量。