抗呕吐毒素多克隆抗体的制备、纯化及鉴定
抗呕吐毒素多克隆抗体的制备、 纯化及鉴定 作者:张银志, 王俊双, 孙秀兰【摘要】 目的: 制备呕吐毒素(DON)的多克隆抗体, 并对抗体效价、 特异性和抑制率进行鉴定。方法: 采用EDC法合成了
抗呕吐毒素多克隆抗体的制备、 纯化及鉴定 作者:张银志, 王俊双, 孙秀兰 【摘要】 目的: 制备呕吐毒素(DON)的多克隆抗体, 并对 抗体效价、 特异性和抑制率进行鉴定。方法: 采用EDC法合成了呕 吐毒素的完全抗原DONBSA, 并通过免疫新西兰大白兔, 得到呕吐 毒素的多克隆抗体。结果: ELISA检测出多抗中含有呕吐毒素的特异 性抗体, 其效价最高为12 800, 其抑制率为50%时, DON的浓度为 10 mg/L, DON的最低检测浓度为0.1 mg/L。与结构类似物T2 毒素和NIV的交叉率分别为9.1%和4.9%。结论: 呕吐毒素经过衍生 化后制备出完全抗原, 经免疫新西兰大白兔后得到的多克隆抗体可以 完全满足ELISA检测的需要。 【关键词】 呕吐毒素; 多克隆抗体; 鉴定 呕吐毒素(vomitoxin)又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇 (deoxynivalenol; DON))[1], 化学名为3α, 7α, 15一三羟基草镰 孢菌9烯8酮, 属单端孢霉烯族化合物。DON主要由禾谷镰刀菌 (Fusarium graminearum)和黄色镰刀菌(Fusarium culmorum.) 产生, 广泛存在于霉变的小麦、 大麦、 玉米等谷物籽实中, 具有急性 毒性、 免疫毒性和胚胎毒性等危害[2-4]。目前国内关于DON的检 测方法, 主要包括薄层层析法(TLC)、 高效液相色谱法(HPLC)、 气相

