油菜甘油-3-磷酸脱氢酶基因的克隆及功能研究

油菜甘油-3-磷酸脱氢酶基因的克隆及功能研究摘要：本研究以油菜为材料，通过PCR技术克隆了油菜甘油-3-磷酸脱氢酶基因（BnGPDH）。通过软件预测和基因结构分析，发现BnGPDH基因编码一个含有95

-3- 油菜甘油磷酸脱氢酶基因的克隆及功能研究 摘要： PCR-3- 本研究以油菜为材料，通过技术克隆了油菜甘油磷酸脱氢酶 BnGPDHBnGPDH 基因（）。通过软件预测和基因结构分析，发现基因编 952C 码一个含有个氨基酸的蛋白质，具有维生素合成和脂肪酸代谢等 PCRBnGPDH 生理过程的重要功能。实时荧光定量结果表明，基因在油 菜幼苗、花和果实各组织中的表达量差异明显，其中在花和果实中表达 量较高，暗示其在油菜花和果实成熟过程中发挥重要作用。本研究为深 C 入研究油菜维生素合成和脂肪酸代谢等生理过程提供了理论依据。 -3-PCR 关键词：油菜；甘油磷酸脱氢酶基因；；实时荧光定量 PCR ；表达分析 Introduction Brassica napus L. 油菜（）是全球重要的粮油作物之一，其种子中含 -3- 有丰富的油脂和营养成分，具有重要的经济价值。甘油磷酸脱氢酶 GPDHC （）是一种重要的细胞色素蛋白，参与维生素生物合成、三酰甘 β-GPDH 油合成和氧化反应等生理过程。目前已经有很多研究探讨了在 GPDH 植物生长和发育中的重要作用，但是对于油菜中基因的研究还比 -3- 较有限，因此本研究旨在从基因水平上研究油菜甘油磷酸脱氢酶基因 的克隆及功能，为深入挖掘油菜生理功能提供理论基础。 Materials and Methods “22” 实验材料：研究对象为油菜品种华油 RNATrizol 总的提取：使用法从油菜的不同组织（根、茎、叶、花 RNA 和果实）中提取总。 cDNAPrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser 合成：使用将 RNAcDNA 提取得到的总反转录成。 PCRGPDH 扩增：根据已报道的其他物种基因序列设计特异引物，