上海交大医学院细胞生物学技术考试重点样本

显微镜技术分辨率( resolution) : 用于表示人眼和仪器, 能够辨别两点之间最小距离的标志, 是衡量显微镜性能的重要指标。人眼的分辨率由人眼的生理结构决定。光镜由光波波长和物镜数值孔径决定。

资料内容仅供您学习参考，如有不当或者侵权，请联系改正或者删除。 一、 显微镜技术 1、 (resolution) :用于表示人眼和仪器, 能够辨别两点之间最小距离 分辨率 的标志, 是衡量显微镜性能的重要指标。 人眼的分辨率由人眼的生理结构决定。光镜由光波波长和物镜数值孔径决定。 电镜由电子束半波长决定。分辨率极限: 人眼( 0.1mm) ;光镜( 0.2μm) ;电 镜( 0.2nm) 。 显微镜技术优化核心是提高分辨率, 体现在两个方面: (1) 光源的采用( 2) 样品制备和信号呈现方法使信噪比提高。 2、 显微镜分类: （1） 光学显微镜: 普通光学显微镜; 荧光显微镜( 激光扫描共聚焦显微镜、 超 高分辨率荧光显微镜、 活细胞荧光工作站) ;相差显微镜: 观察活细胞; 微分 干涉相差显微镜( DIC) :活细胞三维立体投影影像 （2） 电子显微镜: 透射电子显微镜( TEM) ;扫描电子显微镜( SEM) ;分析电 子显微镜; 高压电子显微镜; 冷冻电子显微镜 （3） 扫描探针显微镜: 原子力显微镜 3、 普通光学显微镜主要三部分: 聚光镜、 物镜、 目镜; 光源: 可见光 样品制备5步: 固定( 甲醛) ;脱水( 乙醇) ;包埋( 石蜡) ;冰冻切片( 1-10μm) ;苏木精伊红染色( HE染色) 4、 荧光显微镜光源: 高压汞灯、 弧光灯 荧光的来源: (1) 细胞和组织自发荧光( 2) 外源导入荧光蛋白: 动态检测、 活体检测、 长时间检测、 容易融合( 3) 荧光染料: 吖啶橙染色DNA( 绿) 、 RNA( 橙) (4) 荧光标记抗体: 荧光染料与抗体共价结合( 5) 荧光探针: 金属 离子探针、 细胞内pH值~、 细胞内活性氧~、 线粒体跨膜电位~。 5、 Fluorphore) :吸收能量后具有发光现象的物质, 一般为吸收短波 荧光素( 长的能量后发散出长波长的光, 并随照射停止而消失。荧光素发射光减弱( 光漂 白) 或消失( 淬灭) 。 6、 (LSCM) :以激光作为激发光源, 采用光源针孔与检 激光扫描共聚焦显微镜