探析分离鉴定及spaA基因序列猪丹毒杆菌情况

探析分离鉴定及spaA基因序列猪丹毒杆菌情况红斑丹毒丝菌又称猪丹毒杆菌,为丹毒丝菌科丹毒丝菌属的成员。该菌可感染多种哺乳动物、禽类和水产动物。其中猪感染最为常见,牛、羊、鸡、鸭、鸽子、鱼等多种动物也易

探析分离鉴定及基因序列猪丹毒杆菌情况 spaA 红斑丹毒丝菌又称猪丹毒杆菌为丹毒丝菌科丹毒丝菌属的成员。该菌可感染多种哺乳动 , 物、禽类和水产动物。其中猪感染最为常见牛、羊、鸡、鸭、鸽子、鱼等多种动物也易感 , 人可经外伤局部感染而发生类丹毒。近年来猪丹毒在中国多个省份零星暴 [1,2,3],“”[2], 发或流行性发生其发病率呈上升趋势且常常导致急性死亡给养猪业造成严重的经济损失 ,,,, 严重威胁畜牧业的健康发展。 年月昆明某猪场发生肥猪急性死亡病例发病率为病死率为。病猪主要 20199,,6%,67% 临床表现为体温升高至结膜充血耳朵、腹部和四肢内侧皮肤出现红斑部分病死肥猪 41℃,,; 前天无临床症状病死猪剖检可见肺脏充血出血、脾脏肿大呈樱桃红色、淋巴结肿大出 1; 血。采集脾脏、肺脏和淋巴结组织病料送云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物 ,/ 病毒病重点实验室进行诊断均分离到株革兰阳性多形小杆菌且对小鼠具有较 ,1YN19071, 强致病性。笔者对分离株进行鉴定并对其表面保护性抗原基因进行遗传进化 YN19071A 分析为疫苗株的选择提供科学指导。 , 、材料与方法 1 材料 1.1 主要试剂 1.1.1: 营养琼脂购自北京奥博星生物技术有限公司细菌革兰染色试剂盒购自杭州滨和微生物试剂 , 有限公司细菌基因组提取试剂盒购自天根生化科技北京有限公 ,() 司和购自北京全式金生物技术有限公 ,2×EasyTaq®PCRSuperMixTrans2KDNAMarker 司药敏纸片购自北京天坛药物生物技术开发公司。 , 实验动物 1.1.2: 昆明小鼠购自昆明医科大学。 20g 方法 1.2 细菌分离 1.2.1: 将病死猪肺脏、肝脏和淋巴结分别划线接种于营养琼脂平板培养过夜挑取单菌落进 ,37℃, 行纯培养。挑取菌落制作涂片革兰染色镜检观察菌体形态。 ,, 引物设计 1.2.2: