蛋白标签ChBD及其固相化应用

蛋白标签ChBD及其固相化应用引言:随着生物技术的不断发展,对于蛋白质的研究越来越重要。而研究蛋白质常常需要对其进行纯化。传统的蛋白质纯化技术是基于物化性质的差异,如电泳分离,柱层析纯化等。但是这些方

ChBD 蛋白标签及其固相化应用 引言: 随着生物技术的不断发展,对于蛋白质的研究越来越重要。而研究 蛋白质常常需要对其进行纯化。 传统的蛋白质纯化技术是基于物化性质的差异,如电泳分离,柱层 析纯化等。但是这些方法无法针对单一蛋白进行选择性纯化。因此,需 要一种新的技术。 蛋白标签是一种可以与蛋白质序列特异性结合,具有高选择性和高 亲和力的多肽序列。蛋白标签一般分为两类:N-端标签和C-端标签。其 中N-端标签包括His-tag,GST-tag,MBP-tag;C-端标签包括 FLAG-tag,HA-tag,Myc-tag等。 在这些标签中,His-tag是最常用的,因为它可以通过亲和层析柱中 铁离子的配位作用进行纯化。但是,His-tag具有与其他金属离子结合的 问题。GST-tag可以与谷氨酸S转移酶(GlutathioneS-transferase, GST)结合并通过GST树脂进行纯化,该标签亲和力较小。MBP-tag可 以通过小鼠天冬氨酸蛋白酶(Maltosebindingprotein,MBP)进行纯 化,该标签亲和力较大。FLAG-tag可以通过兔抗FLAG标签抗体进行纯 化,但是纯化多肽易受到蛋白酶的降解。HA-tag可以通过抗-HA抗体进 行纯化,这是最常用的C-端标签之一。Myc-tag可以通过抗-Myc抗体 进行纯化,亲和力较小。 因此,为了解决标签选择的问题,我们引入了一种新的标签 ——ChBD。 1.ChBD标签的介绍 ChBD全称为ChitinBindingDomain,是一种来源于真菌和昆虫 的蛋白结构域,具有与壳质的非胶态基质结合的特性。ChBD标签在蛋白

腾讯文库蛋白标签ChBD及其固相化应用