生物分子学第9章基因工程

生物分子学第9章基因工程第九章基因工程学习目标掌握：1．基因工程的概念。2．基因工程的基本过程。熟悉：1．基因工程常用工具酶2．基因工程载体必备的条件和常用载体了解：1．基因工程在科研和临床中的应用。

生物分子学第9章基因工程 第九章基因工程学习目标掌握：1．基因工程的概念。 2．基因工程的基本过程。 熟悉：1．基因工程常用工具酶2．基因工程载体必备的条件和常用载体了解：1．基因工程在科 研和临床中的应用。 1973年，是Cohen等人首次将不同DNA分子在体外进行连接获得重组DNA分子，并在大肠杆菌 中成功表达，由此开创了基因工程。此后，基因工程作为分子生物学的一项重要技术得到了迅速发 展。基因工程(geneticengineering)又称为分子克隆技术或重组DNA技术，是将目的DNA与具有自 我复制能力的载体DNA连接形成重组DNA分子，然后将其导入受体细胞中进行复制或表达相关基因 产物的过程。利用基因工程可以得到大量的目的DNA分子或目的基因的表达产物，并对其产物进行 分析。在遗传病、心血管病、肿瘤等多种疾病的研究和治疗提供了新的方法和途径，它对生命科学 的发展起到了不可估量的作用。 第一节基因工程的工具酶基因工程中需要对DNA分子进行切割、重新连接、修饰及合成等操 作，这些过程中需要许多酶类来完成，主要有限制性核酸内切酶、外切酶、DNA连接酶、DNA聚合酶 以及反转录酶等。基因工程中常用的工具酶见表9-1。 （一）命名原则及分类限制酶的命名根据首次发现该酶类的细菌的属名与种名相结合的原则， 通常用三个斜体字母的缩略语来表示。第一个字母取自产生该酶的细菌属名，用大写； 第二、第三个字母取自该细菌的种名，用小写； 若细菌有株系，则用第四个字母代表株； 若同一菌株含有多种限制酶，则用罗马数字表示其发现和分离的先后顺序。 例如： EcoRI：E代表Escherichia属co代表coli种R代表RY13株I代表该菌株发现分离出的第一种酶 限制酶根据结构及作用方式不同可分为三类：I型、II型及III型，反应均需要Mg2+参与。I型限 制性内切酶是一类兼有限制性内切酶和修饰酶活性的多亚基蛋白复合体。它们可在远离识别序列的